條石鯛種群遺傳學及養(yǎng)殖生物學研究.pdf

1、條石鯛(Oplegndthus fascia tus)隸屬石鯛科(Oplegnathidae)，廣泛分布于我國黃海、東海和臺灣沿海，主要棲息于沿岸巖礁區(qū)域，以底棲動物為食，是一種高品質(zhì)和高產(chǎn)值的海洋經(jīng)濟魚類。本研究采用DNA分子標記、細胞學標記和實驗生態(tài)學手段，系統(tǒng)觀察和研究了條石鯛群體遺傳結(jié)構(gòu)、種間遺傳分化和早期發(fā)育階段的形態(tài)學、組織學和生態(tài)學特征，為條石鯛種質(zhì)資源保護、雜交育種、人工繁育提供基礎資料和理論依據(jù)。同時，通過人工繁育和養(yǎng)

2、殖生產(chǎn)試驗，建立了條石鯛苗種培育及養(yǎng)殖生產(chǎn)技術工藝流程，為將來條石鯛規(guī)?；藴驶绶N培育以及養(yǎng)殖生產(chǎn)提供技術指導。主要研究成果如下:
　　1、利用熒光-AFLP標記技術，通過4對選擇性引物組合，從3個不同地理群體中共擴增出1264條條帶，發(fā)掘出1248條多態(tài)片段?；蚍只禂?shù)Gst、AMOVA、STRUCTURE分析均顯示條石鯛種群存在顯著的遺傳結(jié)構(gòu)，種群的遺傳變異主要來源于群體間差異(59.55％)，群體內(nèi)個體間差異占40.4

3、5％。NJ系統(tǒng)樹顯示條石鯛三個地理群體存在顯著的譜系地理結(jié)構(gòu)，分為南北兩大支系。
　　2、采用線粒體(mtDNA)控制區(qū)序列分析方法，對條石鯛養(yǎng)殖群體與野生群體的遺傳變異進行分析。在長度為484bp的同源片段中，養(yǎng)殖群體F1代單倍型多樣度水平略低于野生群體，卻顯著高于養(yǎng)殖F2代群體;野生群體、F1代養(yǎng)殖群體和F2代養(yǎng)殖群體的核苷酸多樣度水平和核苷酸差異數(shù)均呈遞減趨勢;AMOVA、兩兩群體相比較的ΦDST和P檢驗結(jié)果皆顯示養(yǎng)殖群體F

4、1代和F2代與野生群體存在顯著的遺傳分化。單倍型最小跨度分析和NJ系統(tǒng)分析結(jié)果均未檢測到顯著的譜系結(jié)構(gòu)。
　　3、條石鯛與斑石鯛屬內(nèi)種間遺傳分化研究結(jié)果顯示，基于線粒體COI、Cytb基因和D-loop片段序列分析結(jié)果顯示兩者平均遺傳距離分別為0.097、0.080和0.172。核苷酸替代速率由大到小依次為D-loop＞COI＞Cyt b，條石鯛和斑石鯛線粒體COI基因片段上的核苷酸替代速率明顯的高于Cytb基因片段，條石鯛和斑石

5、鯛的分歧時間約為385～530萬年，分化事件發(fā)生于上新世早期。本研究結(jié)果為條石鯛與斑石鯛人工雜交育種研究奠定了理論基礎。
　　4、通過對條石鯛染色體核型和C帶分析表明，雄性條石鯛具有1條中部著絲粒的巨型性染色體，染色體數(shù)目為47，其核型為3m+44t，雌性染色體數(shù)目為48，核型為2m+46t，臂數(shù)都為50;雄魚的帶紋總數(shù)為42、雌魚的帶紋總數(shù)為41，異染色質(zhì)含量分別為40.56±0.38％、41.49±0.71％。在雄性條石鯛的異

6、型染色體上具有1條著絲粒帶和2條端帶，可以作為該種特有的帶紋特征。初步推測其性別決定類型為復性染色體型。
　　5、通過對條石鯛早期發(fā)育形態(tài)學及組織學觀察，確定了胚胎發(fā)育時序，詳細闡述了各個發(fā)育階段的形態(tài)特征以及主要功能器官的發(fā)生和形成過程。條石鯛受精卵具有龜裂結(jié)構(gòu)。在22±0.5℃，鹽度為30的條件下，卵子授精后31h仔魚孵出。前期仔魚背鰭膜有4-5個星狀黑色素。12dph，鰓發(fā)育完成;18dph，肝胰臟結(jié)構(gòu)發(fā)育結(jié)束;21dph，

7、眼各部分均已發(fā)育完成;24dph，食道結(jié)構(gòu)已發(fā)育完善;27dph，腸壁、心臟均已發(fā)育完善;29dph，脾臟發(fā)育完善;30dph，胃、鰾發(fā)育完成;33dph，腎臟形成;60dph，胸腺發(fā)育完成。
　　6、條石鯛胚胎發(fā)育的閾值分別是15℃和33℃。條石鯛胚胎發(fā)育的適宜溫度為21～27℃，最適水溫24℃，孵化率為96％。條石鯛仔魚在24℃條件下，初次攝食和PNR點分別為:3dph和5～6dph，最高初次攝食率為76.67％出現(xiàn)在4dph

8、。
　　7、在胚胎期，由于免疫器官沒有發(fā)育完成，所以SOD的活性比仔魚期的還要高。孵化后，SOD的活性在14日齡達到最低點。免疫器官淋巴化的順序為腎臟(10dph)、胸腺(15dph)、脾臟(21dph)。隨著免疫器官的發(fā)育完成，SOD的活性處在一個相對穩(wěn)定的水平。
　　8、通過對條石鯛親魚人工調(diào)控、苗種培育和養(yǎng)殖模式等相關生產(chǎn)技術的試驗，建立了條石鯛人工繁殖及養(yǎng)殖技術的工藝流程。為今后條石鯛規(guī)模化、標準化苗種培育以及養(yǎng)殖生