轉(zhuǎn)AtCBF3基因蘋果株系對鹽堿及重金屬脅迫的響應(yīng).pdf

1、轉(zhuǎn)錄因子CBF與植物體抗低溫、干旱和鹽堿等非生物脅迫能力有關(guān)，其基因轉(zhuǎn)化為植物抗逆基因工程育種提供了新的途徑，也為解決蘋果生產(chǎn)中逆境傷害的問題提供了新的方向。本試驗(yàn)以繼代保存8年的轉(zhuǎn)AtCBF3基因蘋果嘎拉組培試管苗為試材，通過抗卡那霉素篩選和PCR檢測，研究了外源基因在轉(zhuǎn)基因蘋果植株的遺傳穩(wěn)定性;通過不同濃度NaCl、CuSO4的脅迫處理，研究了轉(zhuǎn)基因蘋果株系的外部形態(tài)特征和生理生化特性與抗逆性的關(guān)系;通過溫室移栽試驗(yàn)，研究了溫室環(huán)境

2、對轉(zhuǎn)基因蘋果株系生長狀況的影響以及外源激素對轉(zhuǎn)基因株系的作用。
　　主要研究結(jié)果如下:
　　1、對繼代培養(yǎng)8年的轉(zhuǎn)AtCBF3基因蘋果嘎拉2個(gè)株系組培苗進(jìn)行了卡那霉素抗性篩選和PCR檢測，結(jié)果表明外源nptⅡ和AtCBF3基因在長期繼代保存蘋果組培苗的分化增殖過程中沒有丟失。
　　2、在4 g/L NaCl脅迫處理、相同脅迫時(shí)間下轉(zhuǎn)基因蘋果株系受害指數(shù)顯著低于非轉(zhuǎn)基因株系，同時(shí)轉(zhuǎn)基因株系受害癥狀出現(xiàn)晚于非轉(zhuǎn)基因株系，表

3、明外源AtCBF3基因的導(dǎo)入在一定程度上可提高蘋果組培苗的耐鹽性。
　　3、在4 g/L NaCl脅迫處理下，相同脅迫時(shí)間內(nèi)轉(zhuǎn)基因蘋果株系試管苗相對電導(dǎo)率顯著低于非轉(zhuǎn)基因株系，表明外源AtCBF3基因的導(dǎo)入對維持蘋果組培苗細(xì)胞膜的穩(wěn)定性起到了一定的作用。
　　4、在5 mg/L銅處理下，轉(zhuǎn)基因株系的生根率顯著高于非轉(zhuǎn)基因株系;在10 mg/L銅處理下，轉(zhuǎn)基因蘋果組培苗的愈傷組織發(fā)生率顯著高于非轉(zhuǎn)基因株系。表明外源AtCBF3

4、基因的導(dǎo)入在一定程度上可提高蘋果組培苗對銅的耐性。
　　5、在50 mg/L以上濃度銅脅迫下，轉(zhuǎn)基因蘋果株系的相對電導(dǎo)率顯著低于非轉(zhuǎn)基因株系。表明銅離子脅迫下外源AtCBF3基因的導(dǎo)入對蘋果株系細(xì)胞膜起到了保護(hù)作用。
　　6、在溫室中生長的轉(zhuǎn)基因蘋果植株在冬季來臨前出現(xiàn)葉片衰老、植株矮化、生長停止現(xiàn)象。表明外源AtCBF3基因的導(dǎo)入對轉(zhuǎn)基因蘋果嘎拉植株的生長發(fā)育具有調(diào)節(jié)作用。
　　7、對生長受到抑制的轉(zhuǎn)基因蘋果株系噴施