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1、目的:本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用由四川省抗菌素工業(yè)研究所藥理研究室提供的Lewis肺癌瘤株,建立可靠的Lewis肺癌小鼠模型。旨在通過(guò)測(cè)定青莪湯各劑量組對(duì)Lewis肺癌的各指標(biāo)的影響,探索青莪湯對(duì)Lewis肺癌的抑制及抗轉(zhuǎn)移的機(jī)制。
方法:采用lewis肺癌自傳模型,50只小鼠隨機(jī),分別為腫瘤對(duì)照組,青莪湯大、中、小劑量組,CTX(環(huán)磷酰胺)組。共分5組,每組各10只。動(dòng)物給藥于接種Lewis肺癌后24小時(shí),腫瘤對(duì)照組灌服等體積生理鹽水(0.
2、4ml/20g體重),每日一次,連續(xù)10天;CTX組灌服環(huán)磷酰胺(15mg/kg),每日一次,連續(xù)10天;試驗(yàn)組小鼠按0.9g生藥/kg、2.7g生藥/kg、5.4g生藥/kg的劑量灌服,藥液濃度分別為45mg生藥/ml、135mg生藥/ml和270mg生藥/ml,給藥體積均為0.4ml/20g體重,每日一次,連續(xù)10天。末次給藥后24小時(shí),稱小鼠體重,然后頸椎脫臼處死動(dòng)物,解剖出瘤塊,稱取瘤重,比較實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組差異,計(jì)算腫瘤抑制率;
3、解剖出肺(福爾馬林1~1.5ml灌注固定),肝、腎,投入20%福爾馬林液中固定,在解剖顯微鏡下統(tǒng)計(jì)轉(zhuǎn)移瘤灶后,每肺5葉、肝各葉及雙腎各取組織一塊,常規(guī)脫水,石蠟包埋,切片,HE染色,光鏡下觀察轉(zhuǎn)移瘤,并計(jì)數(shù)。各組腫瘤切取1塊,投入20%福爾馬林液中固定,常規(guī)脫水,石蠟包埋,切片,HE染色,光鏡下觀察病理變化。
結(jié)果:
1、青莪湯各劑量組與環(huán)磷酰胺對(duì)小鼠lewis肺癌的抑制結(jié)果:青莪湯各劑量組(0.9、2.7、5.4g
4、生藥/kg)與腫瘤對(duì)照組比較,對(duì) Lewis肺癌細(xì)胞核分裂均有極顯著抑制作用,青莪湯各劑量組抑制率分別為34—57%,環(huán)磷酰胺抑瘤率為52~60%,其數(shù)目明顯少于腫瘤對(duì)照組(P<0.01或 P<0.05)。青莪湯各劑量組出現(xiàn)顯著的淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)和纖維組織增生,與對(duì)照組比較,有極顯著性差異(P<0.01),提示動(dòng)物細(xì)胞免疫功能增強(qiáng)。纖維組織增生可能對(duì)腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)過(guò)程有所延緩,限制癌細(xì)胞侵入血管內(nèi)或淋巴管內(nèi),從而減少播散的機(jī)會(huì)。環(huán)磷酰胺對(duì)L
5、ewis肺癌細(xì)胞的核分裂也有一定的抑制作用,如第一批與腫瘤對(duì)照組比較:P<0.01,第二批與腫瘤對(duì)照組比較:P<0.05。出現(xiàn)的淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)和纖維組織增生,與對(duì)照組比較,無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
2、青莪湯對(duì)小鼠Lewis肺癌自發(fā)性肺、肝、腎轉(zhuǎn)移的影響.青莪湯(0.9、2.7、5.4g生藥/kg)對(duì)小鼠Lewis肺癌的肺、肝、腎轉(zhuǎn)移有明顯抑制作用。青莪湯大、中、小劑量組和環(huán)磷酰胺組動(dòng)物腎臟均未見癌轉(zhuǎn)移。青莪湯各劑量組肺轉(zhuǎn)
6、移率結(jié)果。肺轉(zhuǎn)移率第1批、第2批中劑量組,第3批小劑量組,腫瘤轉(zhuǎn)移率和腫瘤對(duì)照組比較有顯著性差異(P<0.05);第1、2批大劑量組,以及第3批中、大劑量組與對(duì)照組比較有極顯著性差異(P<0.01)。青莪湯各劑量組肝轉(zhuǎn)移率結(jié)果:肝轉(zhuǎn)移第1批大劑量組、第3批大、中劑量組,腫瘤轉(zhuǎn)移率和對(duì)照組比較有顯著性差異(P<0.05);第2批中、大劑量組與對(duì)照組比較有極顯著性差異(P<0.01)。青莪湯大、中、小劑量組和環(huán)磷酰胺組動(dòng)物腎臟均未見癌轉(zhuǎn)移。
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