多氯聯(lián)苯126預先染毒對苯并[a]芘遺傳毒性的影響及其代謝酶的作用.pdf

1、多氯聯(lián)苯(PCBs)是一類頗受關注的持久性有機污染物（POPs)，對P450 酶的誘導是其重要的生物效應特征。P450 酶在多環(huán)芳烴等外源性化合物的代謝活化過程中扮演重要角色。研究顯示PCBs和多環(huán)芳烴常共存于多種環(huán)境介質和人體生物樣本中，因此研究PCBs和多環(huán)芳烴的聯(lián)合作用具有現(xiàn)實意義。PCB126(3,3',4,4',5–pentachlorobipheny)被認為是最具毒性的PCBs 之一，對P450 酶有很強的誘導能力，B(a)

2、P 是第一個被發(fā)現(xiàn)的環(huán)境致癌物和多環(huán)芳烴致癌物，常被做為多環(huán)芳烴化合物的代表。鑒于P450 酶在B(a)P代謝活化過程中扮演的重要角色，PCB126是否能通過誘導代謝酶的活化從而增強B(a)P 對機體的遺傳毒性呢？本文采用PCB126 預染毒，然后再和B(a)P 聯(lián)合染毒的方式，探討環(huán)境中共存的這兩種污染物是否會比B(a)P 單獨存在造成更強的遺傳損傷，而毒性的增強是否歸因于PCBs 可誘導代謝酶這一特性。 本文以來源于人類的代

3、謝酶完全的人肝腫瘤細胞株HepG2為靶細胞，設PCB126 三個劑量（0.01、0.1、1nmol/L），B(a)P 兩個劑量（12.5、25μmol/L），設二甲基亞砜（DMSO）為溶劑對照，將HepG2細胞經(jīng)PCB126 預染毒48h 后，再與B(a)P 聯(lián)合染毒24h。通過熒光分光光度法測定各組細胞Ⅰ相代謝酶CYP1A1、CYP2B 活性；并采用胞質分裂阻滯法微核實驗（CBMNT）分析各組細胞的微核率（MN‰），并計算核分裂指數(shù)（

4、NDI），以此探討PCB126 對B(a)P致HepG2細胞遺傳損傷的影響及其代謝酶機制。 本文獲得的研究結果如下： ①CYP1A1 酶活性（以CYP1A1 標志酶EROD 活性表示）：與DMSO 溶劑對照相比，12.5μmol/L的B(a)P 單獨作用不引起HepG2細胞EROD 活性顯著增高，而25μmol/L的B(a)P 可使EROD 活性顯著增高；與B(a)P（12.5、25μmol/L）單獨作用相比，相同劑量的

5、B(a)P 經(jīng)各濃度PCB126預染毒后所誘導的EROD 均顯著升高，且隨PCB126 預染毒濃度的增加而增加。 ②CYP2B 酶活性（以CYP2B 標志酶PROD 活性表示）：與DMSO 溶劑對照相比，12.5μmol/L的B(a)P 單獨作用不引起HepG2細胞PROD 活性顯著增高，而25μmol/L的B(a)P 可使PROD 活性顯著增高；與12.5μmol/L的B(a)P 單獨作用相比，相同劑量的B(a)P 經(jīng)各濃度P

6、CB126 預染毒后所誘導的PROD 均顯著升高，且隨PCB126 預染毒濃度的增加而增加；與25μmol/L的B(a)P 單獨作用相比，相同劑量的B(a)P 經(jīng)各濃度PCB126預染毒后所誘導的PROD 無顯著變化。 ③微核誘導:與DMSO 溶劑對照相比，12.5、25μmol/L的B(a)P 單獨作用誘導的微核率均顯著升高；12.5μmol/L的B(a)P 所誘發(fā)的微核率隨PCB126 預染毒濃度的升高而升高，在PCB126

7、 預染毒濃度為0.1、1nmol/L時，B(a)P 所誘導的微核率與相應濃度的B(a)P 單獨作用相比有統(tǒng)計學意義的升高；25μmol/L的B(a)P 所誘發(fā)的微核率也隨PCB126 預染毒濃度的升高而明顯升高，在PCB126 預染毒濃度為0.01、0.1、1nmol/L時，B(a)P 所誘導的微核率與相應濃度的B(a)P 單獨作用相比有統(tǒng)計學意義的升高。 ④核分裂指數(shù)（NDI）:與DMSO 溶劑對照相比，12.5、25μmol

8、/L的B(a)P 單獨作用均引起NDI 顯著降低；與12.5μmol/L的B(a)P 單獨作用相比，相同劑量的B(a)P經(jīng)各濃度PCB126 預染毒后均引起NDI 顯著降低；與25μmol/L的B(a)P 單獨作用相比，相同劑量的B(a)P 經(jīng)各濃度PCB126 預染毒后引起的NDI無統(tǒng)計學差異。 綜上所述，一定劑量的PCB126 能使B(a)P 誘導的HepG2細胞DNA 損傷作用顯著增強，表明PCB126 對B(a)P的遺傳