營(yíng)養(yǎng)水平對(duì)初產(chǎn)母豬妊娠早期胚胎存活和Leptin分泌及基因表達(dá)的影響.pdf

1、本研究以初產(chǎn)母豬為試驗(yàn)動(dòng)物，研究營(yíng)養(yǎng)水平對(duì)妊娠早期胚胎存活和瘦素(Leptin)分泌量及基因mRNA表達(dá)量的影響。試驗(yàn)選取日齡和體重(113.40±9.58kg)相近的長(zhǎng)白×大白雜交初產(chǎn)母豬63頭，配種后隨機(jī)分到三個(gè)營(yíng)養(yǎng)水平組(高、中、低水平)中，各營(yíng)養(yǎng)水平組母豬每天的飼喂量分別為2.0倍、1.2倍和0.6倍的維持需要，每個(gè)營(yíng)養(yǎng)水平組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)7頭豬。分別在母豬妊娠12天、25天和35天稱重、取血和屠宰取樣。然后通過(guò)酶聯(lián)免疫法(

2、ELISA)測(cè)定母豬血清及子宮沖洗液中的Leptin濃度，同時(shí)使用實(shí)時(shí)熒光定量反轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Real Time-quantitativeRT-PCR)的方法研究胚胎中Leptin、瘦素受體(obR)、信號(hào)傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄活化因子-3(STAT3)以及DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-1(DNMT1)基因mRNA的表達(dá)量。試驗(yàn)結(jié)果如下： 1、營(yíng)養(yǎng)水平顯著影響初產(chǎn)母豬妊娠早期的胚胎存活率。在母豬的各妊娠階段(妊娠12天、25天和35天)，中營(yíng)養(yǎng)水

3、平組的胚胎存活率顯著高于高營(yíng)養(yǎng)水平組和低營(yíng)養(yǎng)水平組(P<0.05)，而高營(yíng)養(yǎng)水平組和低營(yíng)養(yǎng)水平組之間的胚胎存活率差異不顯著(P>0.05)。 2、營(yíng)養(yǎng)水平顯著影響初產(chǎn)母豬妊娠早期Leptin的分泌量。母豬妊娠第12天時(shí)，高營(yíng)養(yǎng)水平組血清和子宮沖洗液中Leptin濃度顯著高于中營(yíng)養(yǎng)水平組(P<0.05)，極顯著高于低營(yíng)養(yǎng)水平組(P<0.01)。母豬妊娠25和35天時(shí)，高營(yíng)養(yǎng)水平組血清和子宮沖洗液中Leptin濃度極顯著高于中、低營(yíng)

4、養(yǎng)水平組(P<0.01)；中營(yíng)養(yǎng)水平組血清中Leptin濃度極顯著高于低營(yíng)養(yǎng)水平組(P<0.01)；中營(yíng)養(yǎng)水平組子宮沖洗液中Leptin濃度與低營(yíng)養(yǎng)水平組之間差異不顯著(P>0.05)。母豬妊娠12、25和35天時(shí)，血清和子宮沖洗液中Leptin濃度與母豬采食量呈極顯著的線性增加(P<0.01)；妊娠25天、35天血清中Leptin濃度與母豬屠宰體重呈極顯著的線性增加(P<0.01)。妊娠期初產(chǎn)母豬Leptin的分泌量不斷增加。同一營(yíng)養(yǎng)

5、水平下，隨著妊娠時(shí)間的延長(zhǎng)，母豬血清中Leptin的濃度呈逐漸增加的趨勢(shì)(P<0.05)。 3、營(yíng)養(yǎng)水平影響早期胚胎中Lepfin、obR、STAT3和DNMT1基因mRNA的表達(dá)量。在母豬妊娠各階段(妊娠12天、25天和35天)，不同營(yíng)養(yǎng)水平組胚胎中各基因的表達(dá)(相對(duì)于H2A)結(jié)果如下： 母豬妊娠12天時(shí)，高營(yíng)養(yǎng)水平組Leptin基因mRNA的表達(dá)量極顯著高于中、低營(yíng)養(yǎng)水平組(P<0.01)，而中、低營(yíng)養(yǎng)水平組間差異不

6、顯著(P>0.05)；高營(yíng)養(yǎng)水平組obR基因rnRNA的表達(dá)量極顯著高于低營(yíng)養(yǎng)水平組(P<0.01)，DNMT1基因mRNA的表達(dá)量顯著高于低營(yíng)養(yǎng)水平組(P<0.05)，而中水平組與高、低營(yíng)養(yǎng)水平組差異都不顯著(P>0.05)；高營(yíng)養(yǎng)水平組STAT3基因mRNA的表達(dá)量極顯著高于中、低營(yíng)養(yǎng)水平組(P<0.01)，中水平組顯著高于低營(yíng)養(yǎng)水平組(P<0.05)。母豬妊娠25天時(shí)，高營(yíng)養(yǎng)水平組Leptin基因mRNA的表達(dá)量極顯著高于中、低營(yíng)

7、養(yǎng)水平組(P<0.01)，obR基因mRNA的表達(dá)量顯著高于中、低營(yíng)養(yǎng)水平組(P<0.05)，而后兩者差異不顯著(P>0.05)；高、中營(yíng)養(yǎng)水平組STAT3基因mRNA的表達(dá)量差異不顯著(P>0.05)，高營(yíng)養(yǎng)水平組極顯著高于低營(yíng)養(yǎng)水平組(P<0.01)，而中營(yíng)養(yǎng)水平組顯著高于低營(yíng)養(yǎng)水平組(P<0.05).高、中營(yíng)養(yǎng)水平組DNMT1基因mRNA的表達(dá)量極顯著高于低營(yíng)養(yǎng)水平組(P<0.01)，同時(shí)高營(yíng)養(yǎng)水平組顯著高于中營(yíng)養(yǎng)水平組(P<0.

8、05)。 母豬妊娠35天時(shí)，高營(yíng)養(yǎng)水平組Leptin和DNMT1基因mRNA的表達(dá)量顯著高于中營(yíng)養(yǎng)水平組(P<0.05)，Leptin基因mRNA的表達(dá)量極顯著高于低營(yíng)養(yǎng)水平組(P<0.01)，而DNMT1基因mRNA的表達(dá)量中、低營(yíng)養(yǎng)水平組差異不顯著(P>0.05)；高營(yíng)養(yǎng)水平組obR基因mRNA的表達(dá)量顯著高于低營(yíng)養(yǎng)水平組(P<0.05)，而中水平組與高、低營(yíng)養(yǎng)水平組差異都不顯著(P>0.05)；高、中營(yíng)養(yǎng)水平組STAT3基

9、因mRNA的表達(dá)量極顯著高于低營(yíng)養(yǎng)水平組(P<0.01)，而前兩者差異不顯著(P>0.05)。 結(jié)論： 1、營(yíng)養(yǎng)水平顯著影響初產(chǎn)母豬妊娠早期的胚胎存活率。在妊娠35天前給母豬飼喂1.2倍維持需要的飼糧能獲得較高的胚胎存活率。而高營(yíng)養(yǎng)水平飼喂和嚴(yán)重限飼都會(huì)導(dǎo)致早期胚胎存活率降低。 2、營(yíng)養(yǎng)水平顯著影響初產(chǎn)母豬妊娠早期血清和子宮沖洗液中Leptin的分泌量。母豬血清和子宮沖洗液中Leptin的濃度均隨營(yíng)養(yǎng)水平的增加而

10、升高，且與母豬采食量和屠宰體重正相關(guān)。同一營(yíng)養(yǎng)水平下，隨著妊娠時(shí)間的延長(zhǎng)母豬血清中Leptin的濃度逐漸升高。過(guò)高過(guò)低的Leptin分泌對(duì)胚胎的發(fā)育不利。 3、母豬妊娠早期的營(yíng)養(yǎng)水平顯著影響早期胚胎中Leptin、obR、STAT3和DNMT1基因mRNA的表達(dá)。高營(yíng)養(yǎng)水平(2倍維持需要)上調(diào)這些基因在胚胎中的表達(dá)量，低營(yíng)養(yǎng)水平(0.6倍維持需要)下調(diào)這些基因在胚胎中的表達(dá)量。嚴(yán)重限飼引起胚胎中Levtin、obR、STAT3和