采油用生物表面活性劑生產(chǎn)菌株的篩選與發(fā)酵工藝研究.pdf

1、本文建立了一種采油用生物表面活性劑生產(chǎn)菌的篩選方法，篩選到菌株sy3，鑒定為銅綠假單孢菌(Pseudomonas aeruginosa)。菌株sy3在烴基培養(yǎng)基和非烴基培養(yǎng)基中培養(yǎng)，分別使培養(yǎng)液的界面張力和表面張力下降91.7％和55.1％，具有典型的生物表面活性劑特征。通過對菌株sy3的代謝產(chǎn)物進行分析，證明菌株sy3能夠產(chǎn)生生物表面活性劑，其主要成分為鼠李糖脂，但也含有氨基酸類脂和磷脂類生物表面活性劑。菌株sy3搖瓶發(fā)酵生物表面活性

2、劑的產(chǎn)量為8.0g/L，是一株潛在的生物表面活性劑生產(chǎn)菌。
　　 采用環(huán)境壓力選擇方法對菌株sy3進行處理，富集能夠耐受高濃度生物表面活性劑的自發(fā)突變株。在連續(xù)處理四周，菌體致死率超過90％的條件下，篩選到了一株耐受高濃度生物表面活性劑的自發(fā)突變株sy3-322；經(jīng)發(fā)酵檢測證明，sy3-322菌株是一株鼠李糖脂高產(chǎn)突變菌株；其搖瓶發(fā)酵的鼠李糖脂的產(chǎn)量達到12.5g/L，比出發(fā)菌株的8g/L提高了56％。對菌株sy3-322的搖瓶

3、發(fā)酵培養(yǎng)基碳、氮源進行了優(yōu)化，采用正交試驗確定了最佳發(fā)酵培養(yǎng)基。在最適搖瓶發(fā)酵條件下，菌株sy3-322的鼠李糖脂發(fā)酵產(chǎn)量達到27g/L。
　　 分別采用在7L和25L的自控發(fā)酵罐，研究了菌株sy3-322的生物表面活性劑發(fā)酵工藝，發(fā)現(xiàn)菌株sy3-322生物表面活性劑發(fā)酵屬于生長相關(guān)型。創(chuàng)新性的提出了主從雙發(fā)酵罐系統(tǒng)的發(fā)酵模式，成功的解決了生物表面活性劑發(fā)酵過程中的泡沫溢出液問題。采用溶氧系數(shù)相同法進行了從7L罐到25L罐的放大