貴州民族藥石楠藤的抗凝血作用及藥材質(zhì)量控制研究.pdf

1、目的:觀察貴州兩個產(chǎn)地的石楠藤藥材提取物的抗凝血作用;建立石楠藤藥材的顯微鑒別、薄層鑒別、水分和灰分雜質(zhì)檢查及活性成分含量測定項;初步建立石楠藤藥材的HPLC特征圖譜。從藥材外觀性狀到內(nèi)在質(zhì)量綜合分析該藥材的品質(zhì)，充實貴州民族藥的基礎(chǔ)研究，為該藥材的質(zhì)量標準提升及其相關(guān)產(chǎn)品的質(zhì)量控制提供科學依據(jù)。
　　 方法:1、采用測定小鼠斷尾出血時間(BT)、毛細管法測定凝血時間(CT)及復鈣法測定血漿凝固時間（RT）。2、照《中國藥典》2

2、010版一部附錄ⅥB薄層色譜法，對石楠藤藥材中的活性成分海風藤酮進行薄層鑒別;照《中國藥典》2010版一部附錄ⅨH水分測定法（第一法），測定石楠藤藥材水分含量;照《中國藥典》2010版一部附錄ⅨK灰分測定法，測定石楠藤藥材的總灰分含量;照《中國藥典》2010版一部附錄XA中的醇溶性浸出物測定法，測定藥材的乙醇浸出物含量;照《中國藥典》2010版一部附錄ⅥD高效液相色譜法，通過提取條件和色譜條件的優(yōu)化，建立海風藤酮的含量測定方法，進行不同

3、產(chǎn)地、不同采收期石楠藤藥材中海風藤酮的含量測定分析;采用高效液相色譜法，通過提取條件和色譜條件的優(yōu)化，構(gòu)建石楠藤藥材的HPLC特征圖譜;照《中國藥典》2010版一部附錄XD揮發(fā)油測定法（甲法）提取揮發(fā)油，采用GC-MS法測定兩個產(chǎn)地同一時間采集石楠藤藥材的揮發(fā)油成分。3、通過藥材顯微結(jié)構(gòu)結(jié)合HPLC特征圖譜分析比較石楠藤藥材及市場上常見混淆品之間的差異。
　　 結(jié)果:1、70％乙醇、石油醚提取物等均具有明顯延長小鼠BT的作用，7

4、0％乙醇提取后藥渣的水提物、正丁醇萃取后剩余部分無明顯延長小鼠BT的作用;70％乙醇、石油醚及水提取物均具有明顯延長小鼠CT的作用;而所有提取物對小鼠RT均無明顯影響。2、海風藤酮的薄層鑒別，以硅膠GF254為固定相，石油醚-丙酮(2∶1)為展開劑展開效果較好，供試品色譜中，在與對照品海風藤酮色譜相應(yīng)的位置上，置紫外光燈（254nm）下顯相同顏色的斑點。不同產(chǎn)地石楠藤藥材中海風藤酮的含量有明顯差異，以貴州金沙產(chǎn)藥材的含量最高，貴州赤水產(chǎn)

5、藥材的含量最低;藥材水分含量為4.9％～10.6％，總灰分含量7.2％～14.8％，乙醇浸出物含量為12.6％～21.2％;不同采收期藥材中海風藤酮的含量，從花前期至花期迅速增加，在7月份時達到最高值，果期之后明顯下降;測定的12批石楠藤樣品中有12個特征峰，其相對保留時間的RSD為0.079％～1.1％，峰面積比值的RSD為149.30％～327.44％。3、從藥材顯微構(gòu)造和HPLC特征圖譜分析比較結(jié)果顯示，石楠藤藥材及市場上常見混淆

6、品之間存在較明顯的差異。
　　 結(jié)論:1、石楠藤藥材的提取物具有抗凝血作用，作用特點不同;正丁醇萃取后剩余部分有促凝血作用。2、建立了藥材中海風藤酮的薄層鑒別法和含量測定方法，方法簡便可行、重現(xiàn)性好、結(jié)果準確，為該藥材的質(zhì)量控制提供了實驗依據(jù);石楠藤藥材中海風藤酮含量動態(tài)研究結(jié)果支持《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標準》（2003年版）中石楠藤藥材質(zhì)量標準制定的采收期，該藥材生產(chǎn)在確定采收期時應(yīng)結(jié)合質(zhì)量和產(chǎn)量加以考慮，以夏季至秋季采