人參總皂苷的微生物轉(zhuǎn)化及藥理活性研究.pdf

1、目的：考察從土壤中分離出的微生物（YS2-2）對(duì)人參總皂苷的生物轉(zhuǎn)化作用；并考察轉(zhuǎn)化產(chǎn)物作對(duì)Hela（宮頸癌細(xì)胞）的抑制以及對(duì)S180小鼠肉瘤的抑制作用。論文還考察了發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)APAP（對(duì)乙酰氨基酚）所致小鼠肝損傷的保護(hù)作用。方法：從土壤中分離篩選出人參皂苷生物轉(zhuǎn)化高效菌株 YS2-2，對(duì)人參總皂苷進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化。轉(zhuǎn)化條件為：R2A培養(yǎng)基，30℃震蕩培養(yǎng)4天。通過(guò)TLC（薄層色譜法）、HPLC（高效液相色譜法）檢測(cè)其轉(zhuǎn)化產(chǎn)物；將轉(zhuǎn)化產(chǎn)物用

2、DMSO（二甲基亞砜）配制成濃度分別為200μg/mL、100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL。采用MTT法測(cè)定對(duì)宮頸癌細(xì)胞的抑制率；用腹水型S180腫瘤細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞濃度為1×107個(gè)/mL。將稀釋的瘤液接種于小鼠右腋下，每只小鼠0.2 mL造模24小時(shí)后，灌胃給予發(fā)酵人參300 mg/kg，150 mg/kg，50 mg/kg，7天后稱定腫瘤、胰腺及脾臟重量，考察發(fā)酵人參對(duì)S180的抑制作用及對(duì)免疫器官的影響。在考察發(fā)酵人

3、參對(duì)肝保護(hù)的實(shí)驗(yàn)中，將藥物配置成300 mg/kg，200 mg/kg，1000 mg/kg，給予APAP所致小鼠肝損傷模型，測(cè)定其血清中的ALT（谷丙轉(zhuǎn)氨酶）、AST（谷草轉(zhuǎn)氨酶）值以及肝臟勻漿中的SOD（超氧化物歧化酶）、GSH（谷胱甘肽）值。結(jié)果：微生物 YS2-2對(duì)人參皂苷具有較強(qiáng)的轉(zhuǎn)化能力，其轉(zhuǎn)化產(chǎn)物為人參稀有皂苷Rg3和C-K。不同濃度的發(fā)酵人參對(duì)宮頸癌細(xì)胞的抑制率分別為29.48％，31.65%，34.53%，68.22%

4、。大中小劑量對(duì)S180小鼠肉瘤的抑制率分別為53.03%，34.51%，27.67%。對(duì)APAP所致小鼠肝損傷模型中，在給予300，200，100 mg/kg發(fā)酵人參后，可以降低因APAP導(dǎo)致的肝損傷小鼠血清中AST、ALT活力及肝臟中SOD、GSH水平。結(jié)論：從土壤中分離出的微生物YS2-2能夠轉(zhuǎn)化人參皂苷；并且轉(zhuǎn)化產(chǎn)物對(duì)宮頸癌細(xì)胞有抑制作用，低濃度的抑制作用最為明顯；對(duì) S180小鼠肉瘤細(xì)胞的抑制作用，在高濃度是最為明顯；發(fā)酵人參對(duì)