氰戊菊酯誘導(dǎo)雄性小鼠生殖細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制探討.pdf

1、目的:研究氰戊菊酯誘導(dǎo)的小鼠睪丸生殖細(xì)胞凋亡,探討Fas/FasL信號(hào)通路和線粒體信號(hào)通路在氰戊菊酯誘導(dǎo)小鼠睪丸生殖細(xì)胞凋亡過程中的作用。
　　方法:將36只SPF級(jí)6周齡雄性ICR小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、氰戊菊酯低劑量暴露組和氰戊菊酯高劑量暴露組。氰戊菊酯暴露組小鼠連續(xù)每天給予氰戊菊酯灌胃染毒(15mg/kg或60mg/kg,10ml/kg,溶于玉米油),連續(xù)染毒28天,對(duì)照組小鼠灌胃等容量玉米油溶劑。末次染毒24h后處死小鼠,取睪

2、丸組織稱重并進(jìn)行組織病理學(xué)檢查;用末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記技術(shù)檢測(cè)小鼠睪丸生殖細(xì)胞凋亡發(fā)生情況;用蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測(cè)小鼠睪丸組織細(xì)胞凋亡信號(hào)通路相關(guān)蛋白的表達(dá)水平。
　　結(jié)果:和對(duì)照組相比,氰戊菊酯不同劑量暴露組小鼠睪丸組織重量和睪丸系數(shù)均顯著降低(P<0.05),睪丸組織成熟期(VII–VIII期)生精小管生精細(xì)胞層數(shù)減少,生精細(xì)胞較少且排列紊亂;TUNEL檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn),和對(duì)照組相比,氰戊菊酯各劑量暴露組平均每個(gè)生精小管凋亡細(xì)胞數(shù)和凋亡

3、細(xì)胞陽(yáng)性生精小管百分率均顯著升高(P<0.01);進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn),細(xì)胞凋亡主要發(fā)生在睪丸組織成熟期(VII–VIII期)生精小管和IX–XII期生精小管;蛋白質(zhì)免疫印跡結(jié)果顯示,和對(duì)照組相比,氰戊菊酯各劑量暴露組睪丸組織裂解型Caspase-3蛋白水平顯著上調(diào);進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),睪丸組織Fas、FasL和裂解型Caspase-8蛋白水平顯著上調(diào),且呈劑量-效應(yīng)關(guān)系;小鼠睪丸組織Bax、Bcl-2蛋白水平和對(duì)照組相比無(wú)明顯變化;與對(duì)照組相比