冬凌草不同類型農(nóng)藝性狀比較與品質(zhì)分析.pdf

1、目的：實(shí)驗(yàn)從農(nóng)藝性狀、化學(xué)成分、遺傳基因三方面入手，對篩選出的9種農(nóng)藝性狀穩(wěn)定的冬凌草進(jìn)行綜合評價，有針對性的選育出冬凌草優(yōu)良新品種。
　　方法：以濟(jì)源農(nóng)科院選育出的9種農(nóng)藝性狀穩(wěn)定的冬凌草為實(shí)驗(yàn)材料，采用HPLC法測定9種不同類型冬凌草中次生代謝產(chǎn)物即冬凌草甲素、冬凌草乙素、迷迭香酸含量，對不同類型冬凌草農(nóng)藝性狀、有效成分、產(chǎn)量進(jìn)行加權(quán)評分法對冬凌草植株綜合評價，根據(jù)評分的高低篩選出冬凌草優(yōu)良品種。采用軟件SPSS17.0對株高

2、、節(jié)數(shù)/株高、葉片數(shù)、葉面積、氣孔數(shù)、甲素、乙素、迷迭香酸、產(chǎn)量進(jìn)行相關(guān)性分析及聚類分析，明確農(nóng)藝性狀與產(chǎn)量、有效成分之間的相關(guān)性。運(yùn)用ISSR分子標(biāo)記技術(shù)來探討農(nóng)藝性狀、有效成分的差異是否是由遺傳基因的變異所引起并對其進(jìn)行聚類分析，結(jié)合兩次聚類分析結(jié)果，篩選出冬凌草優(yōu)良新品種。
　　結(jié)果：本實(shí)驗(yàn)從冬凌草的外觀性狀（株高、莖粗、節(jié)數(shù)、葉面積、葉長、葉寬）以及微觀形態(tài)特征（上下表皮細(xì)胞數(shù)、氣孔指數(shù)、密度等）上揭示了冬凌草農(nóng)藝性狀的差

3、異，研究過程中發(fā)現(xiàn)，同一植株冬凌草的葉片也可以出現(xiàn)差異，這反映了冬凌草葉片形態(tài)上的多樣性，同時也表明了冬凌草是一個葉“多形性”的物種。這種現(xiàn)象的存在可能是冬凌草種質(zhì)多樣性的外在體現(xiàn)，這對于篩選冬凌草優(yōu)良新品種及保存具有重要的意義。實(shí)驗(yàn)表明冬凌草外部形態(tài)特征上出現(xiàn)了一定程度的變異，對于其是否產(chǎn)生遺傳變異將進(jìn)行進(jìn)一步研究。相關(guān)性分析結(jié)果表明冬凌草產(chǎn)量與葉片數(shù)、節(jié)數(shù)/株高、氣孔數(shù)呈正相關(guān)。采用軟件SPSS17.0對各次生代謝產(chǎn)物含量的測定結(jié)果

4、進(jìn)行主成分分析以及聚類分析。聚類分析結(jié)果表明，不同類型冬凌草有次生代謝產(chǎn)物差異明顯，主成分分析結(jié)果表明冬凌草甲素、冬凌草乙素、迷迭香酸均為影響冬凌草品質(zhì)的主要因素，為冬凌草新品種審訂奠定了基礎(chǔ)。采用綜合評分方法對9種不同類型冬凌草進(jìn)行綜合評價，結(jié)果表明其范圍在49.7~87.8分，顯著性差異較大。其中7號為最高87.8分為第一級種質(zhì)，其次是3、8、9、4、2號之間沒有顯著性差異，評分分別為76.8分，76.2分，74.4分，72.8分，

5、71.1分，將此5種類型種質(zhì)為第二級種質(zhì)。評分較低的是6、1、5號分別為66.4分，57.0分，49.7分，此3種類型種質(zhì)為第三級種質(zhì)。采用改良后的CTAB法提取9種不同類型冬凌草基因組DNA，并對ISSR-PCR反應(yīng)條件進(jìn)行優(yōu)化，通過利用篩選出的12條引物對9種不同類型的冬凌草材料ISSR分析，探討不同類型冬凌草間遺傳分化的關(guān)系。建立冬凌草ISSR指紋圖譜，計算其遺傳距離并繪制出遺傳關(guān)系樹狀圖。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明不同類型冬凌草遺傳分化較大，

6、其中7號冬凌草遺傳距離較大。
　　結(jié)論：實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明兩次聚類分析的結(jié)果不一致，造成這種結(jié)果的原因很多，基因的表達(dá)受外界環(huán)境地理因素的影響，造成農(nóng)藝性狀、有效成分、產(chǎn)量的不同。結(jié)合不同類型冬凌草農(nóng)藝性狀比較、有效成分品質(zhì)分析、基因組ISSR分子標(biāo)記綜合分析，可以明確不同類型冬凌草品質(zhì)差異較大，為冬凌草新品種的審定提供合理、科學(xué)的依據(jù)，7號冬凌草在外部形態(tài)及有效成分上均優(yōu)于其他類型冬凌草，兩次聚類結(jié)果表明7號冬凌草為單獨(dú)的一類冬凌草。