TGF-β1和NCAM在大鼠腦缺血再灌注后的表達(dá)及藥物干預(yù).pdf

1、目的:1、探討TGF-β1在大鼠腦缺血再灌注后不同時(shí)間的表達(dá)變化及芹菜素和地塞米松對(duì)其表達(dá)的影響。
　　 2、探討NCAM在大鼠腦缺血再灌注后不同時(shí)間的表達(dá)變化及芹菜素和地塞米松對(duì)其表達(dá)的影響。
　　 方法:采用改良線栓法建立大鼠腦缺血(2h)及再灌注后不同時(shí)間損傷模型。動(dòng)物隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham-operated,S,n=7)、模型組(Model,M,n=28)、芹菜素組(Apigenin,A,n=28)和地塞米松

2、組(Dexamethasone,D,n=28)。M組、A組和D組按再灌注時(shí)間不同又分為再灌注6h組(M6h,A6h,D6h,n=7)、24h組(M24h,A24h,D24h,n=7)、72h組(M72h,A72h,D72h,n=7)、7d組(M7d,A7d,D7d,n=7),各4小組,共13小組。A組于再灌注同時(shí)及其后的每24h腹腔注射11.6×10 M芹菜素溶液25mg/kg(0.8ml/100g),D組于再灌注同時(shí)及其后的每24h腹

3、腔注射地塞米松溶液5mg/kg(0.8ml/100g),S組和M組在相同的時(shí)間注射等體積生理鹽水。各組動(dòng)物麻醉清醒后均給予神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分。每組大鼠各6只觀察至規(guī)定時(shí)間經(jīng)心臟灌注固定后用免疫組化法分別檢測(cè)TGF-β1和NCAM表達(dá)、光鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化。每組1只大鼠經(jīng)心臟灌注后做腦組織切片,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色觀察腦梗死灶。
　　 結(jié)果:
　　 1、神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分:M組在7d神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分較6h有減

4、小(P<0.05)；A組在7d神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分較6h、24h有減小(P<0.05),在72h神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分低于M72h組(P<0.05)；D組在7d神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分較6h、24h有減小(P<0.05)；余各相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2、腦組織切片TTC染色:假手術(shù)組腦片均紅染,未見(jiàn)白色梗死灶形成；模型6h組可見(jiàn)較大的尾殼核和額顳頂葉皮層白色梗死灶的融合；地塞米松6h組及芹菜素6h組的梗死灶較相應(yīng)時(shí)間的模型組均有不同程度的

5、減小,主要表現(xiàn)在皮層。
　　 3、大鼠腦組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)變化:M組缺血側(cè)皮層神經(jīng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)模糊、胞體腫脹、胞漿水腫,出現(xiàn)不同程度的核深染、細(xì)胞皺縮,出現(xiàn)明顯空泡化,M72h組病變最明顯。A組和D組較相對(duì)應(yīng)時(shí)間的M組組織水腫有減輕。
　　 4、大鼠腦組織TGF-β1的表達(dá):M組、A組和D組各時(shí)間點(diǎn)都有TGF-β1的表達(dá)增加,其表達(dá)與S組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。術(shù)后各組各時(shí)間點(diǎn)間比較,24h、72h組表達(dá)均明顯增加(P<

6、0.01),7d仍有大量表達(dá)。A組和D組較同期M組表達(dá)均有明顯增加(P<0.01或P<0.05)。A組和D組相對(duì)應(yīng)時(shí)間組之間表達(dá)量無(wú)明顯差異。
　　 5、大鼠腦組織NCAM的表達(dá):M組、A組和D組各時(shí)間點(diǎn)都有NCAM的表達(dá)增加,其表達(dá)與S組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。術(shù)后各組各時(shí)間點(diǎn)間比較,72h組表達(dá)最明顯(P<0.01或P<0.05),7d仍有大量表達(dá)。A組各時(shí)間組較同期M組表達(dá)均有明顯增加(P<0.01)。D組在6h

7、、24h組表達(dá)較同期M組表達(dá)明顯增加(P<0.01),在72h、7d組表達(dá)量與同期M組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論:
　　 1、芹菜素與地塞米松均可增加腦缺血再灌注后TGF-β1的表達(dá),提示芹菜素和地塞米松可能通過(guò)TGF-β1促進(jìn)腦組織損傷的修復(fù),達(dá)到神經(jīng)損傷的保護(hù)作用。
　　 2、芹菜素與地塞米松均可增加腦缺血再灌注后NCAM的表達(dá),提示芹菜素與地塞米松可能通過(guò)NCAM而達(dá)到促進(jìn)腦組織損傷后神經(jīng)細(xì)胞修復(fù)和再生