巨噬細(xì)胞游走抑制因子在糖尿病大鼠心肌中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：通過建立糖尿病大鼠模型，檢測巨噬細(xì)胞游走抑制因子(macrophagemigration inhibitory factor，MIF)在各組大鼠心肌中的表達(dá)，探討：(①M(fèi)IF在糖尿病心肌病變中的作用；②MIF的表達(dá)水平與左室舒張功能障礙(left ventriculardiastolic dysfunction，LVDD)的關(guān)系；③用ISO-1[(S，R)-3-(4-hydroxypheny1)-4，5-dihydro-5-iso

2、xazole acetic acid methyl ester]干預(yù)后對MIF表達(dá)水平的影響及意義。
　　 方法：⑴雄性SD大鼠40只，隨機(jī)分為正常對照(normal control，NOR)組(10只)，糖尿病(diabetic，DM)組(30只)。其中，將DM組隨機(jī)分為糖尿病1個月(diabetes for1 month，DM1)組(10只)，糖尿病2個月(diabetes for2 months，DM2)組(10只)和IS

3、O-1組(10只)。通過高脂高糖飲食和腹腔內(nèi)注射鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)建立DM模型，DM建模成功后給予ISO-1干預(yù)建立ISO-1模型。⑵觀察一般情況，監(jiān)測大鼠血糖、體重、心臟重量指數(shù)的變化。⑶超聲多普勒觀察大鼠心臟左室舒張功能。⑷HE染色觀察心肌組織學(xué)變化。⑸免疫組化染色法檢測MIF在各組大鼠心肌中的表達(dá)。⑹統(tǒng)計學(xué)方法：全部數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析處理，所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，

4、多組間樣本均數(shù)比較根據(jù)方差齊否采用單因素方差分析(ANOVA)或Kruskal-Wallis秩和檢驗分析。樣本間的相關(guān)關(guān)系采用spearman相關(guān)分析。以P<0.05為有統(tǒng)計學(xué)差異。
　　 結(jié)果：①DM組大鼠出現(xiàn)多飲，多食，多尿癥狀。在實(shí)驗?zāi)┢冢cNOR組比較，DM組大鼠血糖明顯升高(P<0.01)；DM組內(nèi)，ISO-1組血糖較DM1組低(P<0.01)，DM1組血糖較DM2組低(P<0.01)。NOR組大鼠體重增加，DM組自成

5、模后體重?zé)o明顯增加，部分明顯消瘦，DM組較NOR組心臟重量指數(shù)升高(P<0.01)；DM組內(nèi)，糖尿病大鼠隨著時間推移，體重逐漸下降，但心臟重量指數(shù)逐漸升高；ISO-1干預(yù)對上述指標(biāo)影響不明顯(P>0.05)。②心臟功能：與NOR組比較，DM2組舒張早期心室充盈速度最大值(E值)與舒張晚期心室充盈速度最大值(A值)的比值(E/A)明顯降低(P<0.01)，DM1組E/A比值高于DM2組，低于ISO-1組。③心肌組織學(xué)變化：NOR組大鼠心肌

6、細(xì)胞排列整齊，胞漿染色均勻，細(xì)胞外間質(zhì)較少，可見少量成纖維細(xì)胞，無炎性細(xì)胞浸潤。ISO-1組心肌細(xì)胞排列稍有紊亂，細(xì)胞外基質(zhì)少量增多，極少炎性細(xì)胞浸潤。DM1組大鼠心肌細(xì)胞排列紊亂，心肌細(xì)胞肥大，細(xì)胞外基質(zhì)及成纖維細(xì)胞增多，有少量炎癥細(xì)胞浸潤。DM2組大鼠心肌細(xì)胞排列更加紊亂，心肌細(xì)胞肥大，細(xì)胞外基質(zhì)及成纖維細(xì)胞明顯增多，且有大量炎癥細(xì)胞浸潤。④免疫組化結(jié)果：陽性信號為棕黃色顆粒，NOR組心肌細(xì)胞胞漿內(nèi)可見散在、著色較淺的陽性顆粒，DM

7、組陽性顆粒數(shù)目顯著增多，著色更深；DM組內(nèi)，DM2組陽性顆粒數(shù)目最多，著色最深，DM1組次之，ISO-1組陽性顆粒數(shù)較少，著色較淺。通過Image-Pro Plus6.0圖像分析軟件示，DM組心肌MIF表達(dá)水平顯著高于NOR組(p<0.01)，且DM2組高于DM1組(P<0.01)，DM1組高于ISO-1組(P<0.01)。⑤通過相關(guān)分析表明：MIF表達(dá)水平與血糖濃度呈正相關(guān)(r=0.85，P<0.01)，此外，E/A值與MIF表達(dá)水平

8、呈負(fù)相關(guān)(r=-0.92，P<0.01)。
　　 結(jié)論：⑴隨著病程的進(jìn)展，DCM大鼠心肌中MIF的表達(dá)水平逐漸增高，表明MIF可能參與糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy，DCM)的發(fā)生發(fā)展。⑵大鼠心肌中MIF的表達(dá)水平越高，LVDD越嚴(yán)重，提示MIF表達(dá)水平可能對預(yù)測心臟LVDD有重要價值。⑶ISO-1組MIF的表達(dá)水平明顯低于DM1組，明顯減輕了心肌的炎癥反應(yīng)，表明以前炎癥因子MIF作為治療靶點(diǎn)來延緩