山核桃MADS轉(zhuǎn)錄因子的H2Y分析和活性組織表達水平檢測.pdf

1、成花是開花植物生命周期中一個重要的生理轉(zhuǎn)變過程,MADS-box基因在高等植物成花時間和花器官形態(tài)建成過程中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。MADS-box轉(zhuǎn)錄因子是MADS基因功能的直接行使者,通常以同源或異源二聚體形式發(fā)揮作用。本實驗基于山核桃雌花芽轉(zhuǎn)錄組454測序,克隆得到了幾個CcMADS基因的開放閱讀框,并進行了初步研究,得到以下結(jié)論。
　　1.多序列比對和進化樹分析表明,得到的CcMADS屬于典型的植物MADS-typeⅡ,分別

2、命名為CcAP1(AHI85952), CcSVP(AHI85951), CcSOC1(AHI85950), CcTM;這些MADS轉(zhuǎn)錄因子具有明確的MIKC分區(qū),其中有高度保守的M區(qū)和相對保守的K區(qū)。
　　2.CcTM不同組織的實時定量PCR(qRT-PCR)實驗顯示,CcTM在根、莖中未檢測到表達,在葉、花芽中大量表達,尤其是花芽中高出7-10倍,暗示其可能在成花過程中發(fā)揮作用。
　　3.酵母雙雜交(H2Y)實驗表明,山

3、核桃AP1和SVP、AP1和FLC1、AP1和FLC2、SVP和FLC1、FLC1和FLC2組合蛋白兩兩相互作用,且CcAP1、CcSVP、CcFLC1、CcFLC2存在自我相互作用。CcSOC1表現(xiàn)一定程度的“惰性”,不與包括自己在內(nèi)任何CcMADSs相互作用。
　　4.CcSOC1結(jié)構(gòu)域的H2Y實驗表明,M區(qū)的存在似乎阻礙了CcSOC1二聚化的形成,K區(qū)的存在表明了CcSOC1仍然有形成同源或異源二聚體的潛力。
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