額爾古納國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)6種林型土壤真菌的多樣性研究.pdf

1、森林土壤與其它陸地土壤的一個(gè)明顯區(qū)別在于，森林土壤多呈酸性，大多數(shù)真菌喜愛偏酸的環(huán)境，因此森林土壤中真菌數(shù)量、種類均要顯著多于其它陸地土壤。通過對(duì)不同林型土壤真菌進(jìn)行多樣性及分類研究，可詳細(xì)地了解森林土壤真菌的分布情況，同時(shí)在分離與鑒定過程中，可獲得大量的真菌資源。額爾古納國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)植物種類比較豐富，具有獨(dú)特的森林類型和土壤類型，森林土壤中蘊(yùn)育著豐富的未開發(fā)真菌，通過對(duì)不同林型土壤真菌多樣性的研究，明確森林土壤真菌數(shù)量、種類和分布

2、，可填補(bǔ)該地區(qū)土壤真菌多樣性研究的空白。通過對(duì)不同森林類型土壤真菌的分離與鑒定，可以獲得大量的森林土壤真菌種質(zhì)資源。
　　本研究對(duì)額爾古納國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)黑樺林、山楊林、樟子松-落葉松混交林、落葉松-白樺混交林、落葉松林、白樺林中土壤真菌進(jìn)行了分離與鑒定。在不同林型中，用5點(diǎn)法采集土壤樣品，用稀釋平板法和PDA培養(yǎng)基進(jìn)行土壤真菌的分離與培養(yǎng)。通過觀測(cè)菌落形態(tài)、生長(zhǎng)速度和顏色，并在光學(xué)顯微鏡下觀察土壤真菌的形態(tài)特征及對(duì)分離到的菌株進(jìn)

3、行rDNA-ITS序列分析，鑒定出土壤真菌的屬、種。選取有代表性的21個(gè)菌株進(jìn)行基于rDNA-ITS基因序列的系統(tǒng)發(fā)育多樣性分析。通過PCR-DGGE實(shí)驗(yàn)分析不同林型之間土壤真菌種類、數(shù)量及優(yōu)勢(shì)菌種的異同。結(jié)果如下:
　　(1)通過稀釋平板法對(duì)6種林型中可培養(yǎng)土壤真菌進(jìn)行分離培養(yǎng)，共分離到93株真菌，經(jīng)過形態(tài)學(xué)與分子生物學(xué)鑒定93株真菌分屬于26屬40種，并比較各個(gè)林型土壤中可培養(yǎng)真菌的異同。結(jié)果表明:土壤真菌區(qū)系與森林類型密切相

4、關(guān)，青霉屬（Penicillium）和被孢霉屬（Mortierella）為各林型土壤真菌的優(yōu)勢(shì)種群，每個(gè)林型還存在著其特有的土壤真菌菌種。
　　(2)本研究對(duì)額爾古納國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)不同林型土壤可培養(yǎng)真菌群落結(jié)構(gòu)特點(diǎn)進(jìn)行研究，得到大量的微生物種質(zhì)資源。如從森林土壤中分離到無(wú)柄大團(tuán)囊蟲草(Elaphocordyceps subsessilis)、深黃傘形霉（Umbelopsis isabellina）等具有潛在藥用價(jià)值真菌。

5、　　(3)經(jīng)PCR-DGGE電泳后，根據(jù)DGGE圖譜中條帶多少和亮度的不同，得出森林土壤真菌區(qū)系與森林類型密切相關(guān)。各林型土壤真菌多樣性高低順序依次為:落葉松-白樺混交林、落葉松林、樟子松-落葉松混交林、山楊林、白樺林和黑樺林，同時(shí)各個(gè)林型土壤中優(yōu)勢(shì)真菌種類是不相同的。
　　(4)經(jīng)過Quantity One4.5.2軟件對(duì)DGGE圖譜進(jìn)行分析后，得出:林型相似，土壤中真菌種類越相近，相反，林型差異越大，土壤中真菌種類差異就越大。