菊花多糖的提取分離和生物活性研究.pdf

1、菊花（Chrysanthemum morifolium Ramat.）原產(chǎn)于中國(guó)，是一種藥食同源的中藥。其化學(xué)成分主要有萜類、黃酮類和多糖類等化合物，其中菊花粗多糖具有明顯的免疫調(diào)節(jié)等活性，但進(jìn)一步有關(guān)其分離純化及生物活性的深入研究迄今鮮有報(bào)道。
　　本課題設(shè)計(jì)優(yōu)化菊花多糖的提取工藝，并對(duì)分離純化得到的均一多糖進(jìn)行相應(yīng)的化學(xué)結(jié)構(gòu)與生物活性研究，旨在為開(kāi)發(fā)治療腫瘤的候選藥物奠定科學(xué)基礎(chǔ)。
　　以杭菊花、懷菊花和亳菊花為原料，通

2、過(guò)正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化水提醇沉法提取菊花多糖的工藝，結(jié)果三種菊花中的多糖類化合物均以提取次數(shù)和提取時(shí)間對(duì)其得率影響最大。再經(jīng)離子交換樹(shù)脂和凝膠過(guò)濾柱層析分離純化，得到6種中性均一多糖和3種酸性均一多糖。應(yīng)用高效凝膠滲透色譜（HPGPC）、紅外光譜（IR）及氣相色譜（GC）等技術(shù)方法對(duì)均一多糖的一級(jí)結(jié)構(gòu)特征進(jìn)行初步分析，結(jié)果所得9種均一多糖CMTA0S1、CMTA0S3、CMTA1aS1、CMJA0S1、CMJA0S2、CMJA2S2、CMBA0

3、S1、CMBA0S3和CMBA1aS1的重均分子量依次為7.52×104、7.80×103、6.12×104、7.80×104、1.04×104、3.61×104、5.79×104、1.35×104和5.19×104。9種多糖中均含有阿拉伯糖和半乳糖，其中6種中性均一多糖CMTA0S1、CMTA0S3、CMJA0S1、CMJA0S2、CMBA0S1和CMBA0S3主要由半乳糖、阿拉伯糖和葡萄糖組成，且以末端-、1,5-呋喃阿拉伯糖，1,

4、4-、1,3,6-吡喃半乳糖和1,4-吡喃葡萄糖5種連接方式為主；3種酸性均一多糖CMTA1aS1、CMJA2S2和CMBA1aS1由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖和半乳糖醛酸組成。
　　通過(guò)NF-κB信號(hào)抑制實(shí)驗(yàn)，神經(jīng)瘤細(xì)胞（Neuro-2a）、胰腺癌細(xì)胞（PANC-1）和肝細(xì)胞（LO2）的MTT實(shí)驗(yàn)及人源微血管內(nèi)皮細(xì)胞（HMEC-1）的管腔生成實(shí)驗(yàn)對(duì)菊花多糖的生物活性進(jìn)行測(cè)定。研究發(fā)現(xiàn)針對(duì)核因子NF-κB活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，CMTA0

5、S1和CMJA0S1有潛在的免疫激活活性。MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明雖然菊花多糖對(duì)Neuro-2a的抑制作用不如5-氟尿嘧啶，但均對(duì)PANC-1具有明顯抑制作用，以CMTA0S3和CMJA0S2抑制率最強(qiáng)，接近70％且呈現(xiàn)出良好的濃度依賴性，同時(shí)未見(jiàn)肝毒性?？寡苌苫钚匝芯勘砻?CMTA0S3、CMJA0S1和CMJA0S2均能明顯抑制HMEC-1細(xì)胞的管腔生成。
　　本課題首次從三種菊花中分離獲得9種均一多糖，并對(duì)其生物學(xué)活性進(jìn)行了初