賀蘭山紫蘑體內(nèi)抗肝癌及對急性肝損傷保護作用的初步研究.pdf

1、賀蘭山紫蘑是生長于賀蘭山青海云杉林中以紫紅絲蘑菌為主的數(shù)種絲蘑菌的統(tǒng)稱，是當(dāng)?shù)刈钬撌⒚恼滟F食用菌。目前，針對賀蘭山紫蘑的研究僅見于其化學(xué)成分分析方面，而對于紫蘑生物活性的研究罕見報道。據(jù)目前資料顯示，許多大型真菌都具有顯著且多途徑多機制的抗腫瘤功效。因此，本研究以肝癌為例，通過建立小鼠H22實體瘤模型，研究賀蘭山紫蘑的抗腫瘤活性及其作用機制;并探討賀蘭山紫蘑對CCL4急性肝損傷的預(yù)防保護作用。本研究主要內(nèi)容和結(jié)果如下：
　　

2、⑴賀蘭山紫蘑各提取物的制備:以紫紅絲蘑菌為材料，超聲輔助95％乙醇浸泡提取，利用系統(tǒng)溶劑法進行萃取得石油醚相、乙酸乙酯相和正丁醇相;并用水提醇沉結(jié)合脫色素法進行粗多糖的制備。
　　 ⑵賀蘭山紫蘑對H22荷瘤小鼠的抑瘤作用:通過建立H22肝癌實體瘤動物模型，研究賀蘭山紫蘑的抗腫瘤活性，發(fā)現(xiàn)紫蘑各提取物對腫瘤生長均有一定的抑制作用，其中紫蘑多糖抑瘤率高達75.24％，正丁醇及乙酸乙酯部位也顯示了較高的抑瘤率，后兩者的抑瘤作用和陽性對

3、照香菇多糖相當(dāng);同時，紫蘑對免疫器官無損傷，小鼠脾指數(shù)、胸腺指數(shù)均高于模型對照組和陽性對照氟尿嘧啶組;西藥氟尿嘧啶雖具有81.87％的高抑瘤率，但其胸腺指數(shù)、脾指數(shù)均為最低值。Western-blot檢測相關(guān)凋亡蛋白表達量，結(jié)果顯示，紫蘑能有效下調(diào)BCL-2蛋白的表達量，石油醚及乙酸乙酯部位最為顯著，同時乙酸乙酯相還能促使P53、BAX蛋白表達量的增多。實驗又經(jīng)ELISA檢測了小鼠血清IL-2、TNF-α和INF-γ三種細胞因子的表達量

4、，紫蘑多糖和乙酸乙酯組小鼠血清IL-2含量顯著高于其它各組(P＜0.05);正丁醇組小鼠血清TNF-α含量最高，與陽性對照香菇多糖組處于同一水平(P≥0.05);同時，紫蘑各提取物均能有效提高小鼠血清INF-γ含量，其中乙酸乙酯部位和紫蘑多糖的作用最為顯著。
　　 ⑶紫蘑對H22荷瘤小鼠體內(nèi)抗氧化酶系統(tǒng)的影響:結(jié)果顯示，乙酸乙酯相、正丁醇相和紫蘑多糖能顯著提高小鼠肝組織T-SOD酶活力，并有效降低MDA含量達正常小鼠水平;而西藥

5、氟尿嘧啶組小鼠肝組織MDA含量最高;乙酸乙酯部位和紫蘑多糖能有效提高小鼠肝組織CAT活力(P＜0.05);且使小鼠肝組織GSH-PX活力達到正常小鼠水平(P≥0.05)。
　　 4、紫蘑提取物對急性肝損傷的預(yù)防保護作用:紫蘑提取物及陽性對照提前灌胃飼養(yǎng)小鼠2個月后，用CCL4造成小鼠急性肝損傷，檢測小鼠血清相關(guān)指標(biāo)。結(jié)果顯示，與模型組相比，紫蘑各提取物能有效降低血清ALT、AST酶活力達正常小鼠水平，且其治療效果與藥物對照相當(dāng)(

6、P≥0.05)，尤以乙酸乙酯部位及紫蘑多糖效果最為顯著;模型組小鼠血清TP、ALB含量急劇下降，而乙酸乙酯組及紫蘑多糖組小鼠的血清TP、ALB含量顯著升高，高于正常組;同時，紫蘑四種提取物還能有效降低血清TBIL含量，效果優(yōu)于2種陽性對照(P＜0.05)。測定肝組織抗氧化能力發(fā)現(xiàn)，紫蘑各提取物能顯著降低肝組織MDA含量，并提高SOD、GSH-PX的活力達正常小鼠水平(P＜0.05)。
　　 通過上述對H22肝癌荷瘤小鼠抑瘤作用及