家蠶抗BmNPV相關(guān)蛋白及BmNPV病毒粒子蛋白組成研究.pdf

1、家蠶核型多角體病毒(Bombyx mori Nuclear Polyhedmsis Virus，NPV)是昆蟲病毒史上首先發(fā)現(xiàn)的，世界養(yǎng)蠶國家每年由NPV病引起的蠶繭損失是巨大的。BmNPV病毒基因組已經(jīng)解析，家蠶抗BmNPV的分子標(biāo)記以及mRNA差異顯示分析也有報(bào)道，但是從蛋白質(zhì)組水平研究工作尚未開展。 本研究以家蠶抗BmNPV品系、感性品系以及近等基因系為材料，通過二維電泳和質(zhì)譜技術(shù)聯(lián)用的方法，對(duì)家蠶中腸、血液、脂肪體進(jìn)行抗

2、BmNPV差異蛋白質(zhì)組研究。同時(shí)，也研究了BmNPV蛋白質(zhì)表達(dá)譜和蛋白鑒定。其結(jié)果如下： 1、在五齡起蠶第10小時(shí)和第18小時(shí)的血淋巴液中共分離出19種差異蛋白。其中在第10小時(shí)中找到了9種差異蛋白，抗性品系中表達(dá)量高于感性品系的蛋白有：富含半胱氨酸的分泌型酸性蛋白，Rab family GTPase，Mod(mdg4)-heS00531，ALY，僅在感性品系中發(fā)現(xiàn)的蛋白有phosphoribosyl pyrophosphate

3、 synthetase 和putative transposase yabusame-W。在第18小時(shí)中找到了5種差異蛋白，抗性品系中表達(dá)量高于感性品系的蛋白有：β-1，3-葡聚糖識(shí)別蛋白，酚氧化酶，而羥脯氨酸異構(gòu)酶，溶酶體硫醇還原酶IP30前體1型是只在306和BC8兩個(gè)品種中有，而在NB品種中沒有明顯表達(dá)。有意義的是在兩個(gè)時(shí)間段里，氨基酰化酶只特異在抗性品系中表達(dá)。 2、在家蠶中腸中共分離出14種差異蛋白。其中在不添食BmN

4、PV病毒的三個(gè)品系的表達(dá)圖譜中共獲得9種差異蛋白?？剐云废抵刑赜械臑椋篵eta-glucosidase，protein disulfide isomerase，heat shock 70 kD protein cognate，tropomyosin isoform 1和serpin-2。而juvenile hormone diol kinase和calponin/transgelin是感性品系所特有的。在添食BmNPV病毒的三品系中獲得

5、了5種差異蛋白，其中抗性的表達(dá)量要高于感性品系的蛋白別為：similar to CG11267.PA，核糖體蛋白，bolA-like 3，脂肪酸結(jié)合蛋白(fatty acid binding protein)和翻譯起始因子(translation initiation factor 5A)。 3、在家蠶脂肪體中共分離出20種差異蛋白。在不添食BmNPV病毒的三個(gè)品系中得出9種差異蛋白。在抗性品系中有的分別為：tropomyos

6、in isoform 6，pol polyprotein，GA16543 gene product fromtranscript GA16543-RA，similar to bicaudal CG3644-PA，isoform A，Phosphoglycerate kinase(PGK)和arginine kinase。同時(shí)也發(fā)現(xiàn)在感性品系和近等基因系上存在的而在抗性品系NB上沒有的蛋白點(diǎn)是heat shock cognate prot

7、ein和glutathione S-transferase 2。另外在添食BmNPV病毒的三個(gè)品系中得出10種差異蛋白，其中9個(gè)是存在抗性品系中，分別為：reverse transcriptase，heat shock cognate protein，tropomyosin isoform 5，protein disulfide isomerase，ribosomal protein L21，Annexin IX-A，Protein o

8、f unknown function(DUF1676)和Actin3。，另外1種是感性品系和近等基因系BC8中發(fā)現(xiàn)的分別為：Troponin。 4、鑒定了BmNPV病毒(ODV)中的20種蛋白。分別是：Polyhedrin，BmNPV off133，Pk2，Bro-e，IE-0，VP80，BmNPV orf87，BmNPV orf94，DNA polymerase Helicase，GP41，VP39，IE1，Lef3，Lef2