骨髓間充質(zhì)干細胞與血管平滑肌細胞在大鼠后肢缺血模型中促血管新生能力的比較.pdf

1、背景：細胞治療誘導(dǎo)的血管新生已發(fā)展成為治療外周血管疾病的新策略。既往研究證實，骨髓間充質(zhì)干細胞（Mesenchymal Stem Cells，MSCs）和血管平滑肌細胞（Vascular Smooth Muscle Cells，VSMCs）均具有分泌成血管因子及參與血管新生的能力。本研究旨在比較這兩種細胞在大鼠后肢缺血模型中促血管新生的能力。
　　 方法：使用密度梯度離心法從大鼠骨髓中分離骨髓間充質(zhì)干細胞，并通過酶消化法從大鼠胸

2、主動脈中獲得血管平滑肌細胞。Transwell小室和MTT法用于觀察兩種細胞的條件培養(yǎng)基對人臍靜脈內(nèi)皮細胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells，HUVECs）和血管平滑肌細胞增殖和遷移功能的影響。在無血清缺氧環(huán)境下培養(yǎng)細胞以對比兩種細胞在缺氧環(huán)境的存活率。結(jié)扎大鼠左側(cè)股動脈及其分支建立后肢缺血模型，并將這些大鼠隨機分為三組，即MSCs組，VSMCs組及PBS組，分別在大鼠缺血后肢肌內(nèi)注射相同數(shù)量

3、的MSCs或VSMCs（每只大鼠2.5×106）或同等劑量的PBS。細胞移植后3周，堿性磷酸酶染色法顯示毛細血管，用毛細血管數(shù)量和肌纖維的比值表示毛細血管密度?？笴D3的多克隆抗體顯示組織內(nèi)T淋巴細胞用以評價局部同種異體免疫排斥反應(yīng)。同時，還檢測了缺血組織內(nèi)血管內(nèi)皮生長因子VEGF及肝細胞生長因子（HGF）的表達量。
　　 結(jié)果：兩種條件培養(yǎng)基均具有促進HUVECs和VSMCs的增殖和遷移的作用。兩種細胞對缺氧刺激的耐受力相同。

4、缺血組織中的毛細血管密度在MSCs組明顯高于VSMCs組（2.49±0.154 vs.1.8±0.146，P<0.05），在VSMCs移植組中可較對照組顯著提高（1.8±0.146 vs.1.42±0.066，P<0.05）。兩種細胞移植組中均并未發(fā)現(xiàn)明顯的免疫排斥反應(yīng)。與VSMCs移植相比，MSCs移植組的大鼠缺血組織可表達較高水平的VEGF和HGF。
　　 結(jié)論：本研究證明MSCs、VSMCs作為治療肢體缺血的候選細胞是安全