植物病原真菌乙酰乳酸合成酶(ALS)及其抑制劑的研究.pdf

1、紋枯病菌（Rhizoctonia solani）和禾谷鐮刀菌（Fusarium graminearum）是禾本科作物的重要病原菌，其引起的水稻紋枯病等菌核病和小麥赤霉病等病害每年產(chǎn)生的損失巨大，危害十分嚴(yán)重。乙酰乳酸合成酶（Acetolactate synthase，ALS）是植物和微生物體內(nèi)三種支鏈氨基酸生物合成過程中影響第一階段的關(guān)鍵性酶，但并不存在于動物體內(nèi)，其作為一種重要的除草劑靶標(biāo)已被廣泛證實和應(yīng)用，但對于真菌ALS的研究甚少

2、。
　　本文旨在探索以ALS為靶標(biāo)開發(fā)紋枯病菌和禾谷鐮刀菌病害防治藥劑的可能性。研究結(jié)果如下;
　　1.選取兩種植物病原真菌紋枯病菌、禾谷鐮刀菌和兩種植物水稻（日本晴）、油菜（上海四月慢）為實驗材料，進(jìn)行ALS制備研究。在借鑒前人研究方法和經(jīng)驗的前提下，本試驗從病原菌接種方法、接種時期、粗酶提取、酶活性測定等四個ALS活性鑒定的關(guān)鍵環(huán)節(jié)入手，總結(jié)了一套可用于真菌及植物ALS活性和離體化合物抑制的測定方法，為進(jìn)行ALS活性特異

3、性研究、ALS抑制化合物篩選研究等提供了良好的基礎(chǔ)和借鑒。
　　2.利用根據(jù)已有ALS抑制劑結(jié)構(gòu)特點設(shè)計合成的31種嘧啶氧芐胺類化合物，以雙草醚為對照，測定了100ppm濃度下它們對水稻、油菜、紋枯病菌和禾谷鐮刀菌ALS的抑制效果，結(jié)果發(fā)現(xiàn)同一化合物對不同ALS的作用效果存在差異;能抑制紋枯病菌ALS活性的有6種，能抑制禾谷鐮刀菌ALS活性的有10種，能抑制水稻ALS活性的有12種，能抑制油菜ALS活性的有8種。僅對一種生物類型A

4、LS產(chǎn)生抑制作用的有11種，能對兩種生物類型ALS產(chǎn)生抑制作用的有4種，能對三種生物類型ALS產(chǎn)生抑制作用的有3種，對四種ALS均能產(chǎn)生抑制作用的有2種。能抑制多種生物類型的化合物對不同類型的ALS的抑制率存在差異。
　　3.通過100ppm濃度下31種化合物對紋枯病菌和鐮刀菌生長的抑制效果分析，發(fā)現(xiàn)對紋枯病菌生長有較明顯抑制作用的有27種，對禾谷鐮刀菌生長有較明顯抑制作用的有11種。比對待測化合物對兩種真菌ALS和對菌絲生長的抑

5、制率，發(fā)現(xiàn)兩者之間存在差異。能抑制紋枯病菌生長而對其ALS無明顯作用的化合物有22種，能抑制紋枯病菌ALS而對其菌絲生長無明顯作用的有1種，對ALS和菌絲生長均能抑制的有5種;能抑制禾谷鐮刀菌生長而對其ALS無明顯作用的化合物有5種，能抑制禾谷鐮刀菌ALS而對其菌絲生長無明顯作用的有4種，均能抑制ALS和菌絲生長的有6種。
　　4.對其中的化合物12＃進(jìn)行不同濃度的抗菌活性測定，發(fā)現(xiàn)該化合物濃度與對鐮刀菌生長的抑制率呈正相關(guān)。