組織工程動(dòng)脈血管組織構(gòu)建的初步實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：1)運(yùn)用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲取犬的血管平滑肌細(xì)胞，并培養(yǎng)擴(kuò)增，為組織工程動(dòng)脈的構(gòu)建提供種子細(xì)胞；2)評(píng)價(jià)bFGF調(diào)控犬血管平滑肌細(xì)胞增殖的合理劑量，及其對(duì)平滑肌細(xì)胞在生物可降解材料上生長(zhǎng)的影響；3)對(duì)新合成的生物可降解材料進(jìn)行細(xì)胞毒性及生物相容性評(píng)價(jià)，探討它們作為組織工程動(dòng)脈血管支架材料的可行性；4)進(jìn)行組織工程動(dòng)脈組織構(gòu)建的初步實(shí)驗(yàn)，為最終獲得組織工程動(dòng)脈移植體并應(yīng)用到臨床奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)?！　》椒ǎ?)采用組織貼塊法培養(yǎng)犬的血管平滑肌

2、細(xì)胞，并進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)。觀察細(xì)胞的形態(tài)、生長(zhǎng)情況，進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，及電鏡檢測(cè)?！　?)對(duì)培養(yǎng)的平滑肌細(xì)胞給予不同劑量的bFGF，作用不同時(shí)間后應(yīng)用四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法檢測(cè)，比較不同劑量bFGF組之間的平滑肌細(xì)胞增殖情況。　　3)應(yīng)用L929細(xì)胞株進(jìn)行生長(zhǎng)抑制實(shí)驗(yàn)，結(jié)合MTT法分別對(duì)幾種新合成支架材料的細(xì)胞毒性進(jìn)行評(píng)價(jià)?！　?)將平滑肌細(xì)胞種植于膠原膜上，培養(yǎng)13天后形成多層生長(zhǎng)的平滑肌細(xì)胞層，再將內(nèi)皮細(xì)胞接種在其

3、表面培養(yǎng)兩天，形成單層內(nèi)皮細(xì)胞層和多層平滑肌層組成的血管組織?！　〗Y(jié)論：1)犬血管平滑肌細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞可作為組織工程動(dòng)脈實(shí)驗(yàn)研究的種子細(xì)胞?！　?)bFGF能夠明顯刺激犬的血管平滑肌細(xì)胞增殖，其合理劑量為3ng/mL；在構(gòu)建組織工程動(dòng)脈時(shí)可以應(yīng)用bFGF進(jìn)行調(diào)控。 3)水凝膠、PHBV、PU、PHBV和PU共混體的細(xì)胞毒性達(dá)到國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，可以作為組織工程材料進(jìn)行應(yīng)用。 4)可以應(yīng)用犬的血管平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞在膠原載體