雙酚A對成年雄性大鼠生殖系統(tǒng)的影響.pdf

1、目的:雙酚A是一種環(huán)境內(nèi)分泌干擾物,廣泛存在于食品飲料包裝、粘合劑、建筑材料、電子元件和紙張涂料中。既往研究表明雙酚A可能對生殖系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、代謝系統(tǒng)、腦發(fā)育及心理行為存在威脅,也有研究表明,雙酚A對男性生殖健康存在不利影響,但在每日容許攝入量水平下是否存在損害作用尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)研究擬觀察長期食物添加每日容許攝入量的雙酚A,對成年雄性Wistar大鼠生殖系統(tǒng)的影響,并探討雙酚A對生殖功能的作用機(jī)制,為雙酚A對男性生殖健康的研究提供科

2、學(xué)依據(jù)。
　　方法:40只成年Wistar雄性大鼠,體重(195±10g)。隨機(jī)分為4組,依據(jù)在飼料中添加雙酚A的劑量,分別命名為:溶劑對照組(C)(雙酚A劑量為0μg/kg.bw),高劑量組(B250)(雙酚A劑量為250μg/kg.bw),中劑量組(B50)(雙酚A劑量為50μg/kg.bw),低劑量組(B10)(雙酚A劑量為10μg/kg.bw)。將不同劑量的雙酚A溶于相同體積的玉米油中,配置出不同濃度的混合液。每組取相同0

3、.3ml體積的混合液,與5g普通大鼠飼料相混合,攪拌均勻,即得到含有不同劑量雙酚A的飼料。對照組,則使用0.3ml玉米油與飼料直接混合,攪拌均勻。飼養(yǎng)動(dòng)物期間,每天早上8點(diǎn)給予大鼠5g含有玉米油和雙酚A(對照組只有玉米油)的飼料,下午5點(diǎn)再給予大鼠適量普通飼料,任其自由食用記錄大鼠的進(jìn)食量。在喂養(yǎng)期間,記錄大鼠體重,觀察大鼠生存、活動(dòng)狀態(tài)。喂養(yǎng)35周后,處死大鼠。于冰盤上迅速分離大鼠肝臟、腎臟、心臟、睪丸、附睪組織,除去脂肪組織和筋膜,

4、用濾紙吸取多余組織液和血液,置于電子天平稱重,記錄重量。分離大鼠兩側(cè)附睪,取一側(cè)附睪迅速稱重后,置于10ml生理鹽水中,用眼科剪剪碎睪組織,在37℃下孵育15min。用一次性吸管吸取適量上述附睪液,均勻涂布在載玻片上。制成精子畸形涂片后,在顯微鏡下計(jì)數(shù)精子畸形數(shù)目,計(jì)算精子畸形率。稱重后將大鼠右側(cè)睪丸組織分成5份,分別裝入EP管,于-80℃冰箱凍存。用實(shí)時(shí)定量PCR方法檢測大鼠睪丸組織中自殺相關(guān)因子(Fas/FasL)mRNA含量、天冬

5、氨酸特異酶切的半胱氨酸蛋白酶3(Caspase3)mRNA含量、G蛋白偶聯(lián)受體(GPER)mRNA含量。
　　結(jié)果:1.雙酚A組大鼠,體重、肝臟系數(shù)、腎臟系數(shù)、心臟系數(shù)與對照組相比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　2.與對照組相比,高劑量組(雙酚A染毒量為250μg/kg.bw)大鼠精子畸形率升高,且P<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3.雙酚A組大鼠睪丸組織中FasmRNA的含量與對照組相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)

6、意義(P>0.05)。高劑量組大鼠睪丸組織中FaslmRNA的含量高于對照組,經(jīng)統(tǒng)計(jì),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。高劑量組大鼠睪丸組織中Caspase3mRNA的含量高于對照組,并且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。各雙酚A組大鼠睪丸組織中GPERmRNA的含量與對照組相比,經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　結(jié)論:在本實(shí)驗(yàn)條件下,250μg/kg.bw雙酚長期暴露對成年雄性大鼠生殖功能具有一定的影響,但未觀察