長梗山龍眼組織培養(yǎng)與播種繁殖研究.pdf

1、長梗山龍眼(Protea coronata)是山龍眼科(Proteaceae)山龍眼屬(Protea)的一種常綠灌木，是一類較新的切花及園林觀賞植物資源，主要分布于非洲南部及澳大利亞南部，西南林學(xué)院在948項目的資助下引進(jìn)了本種的種子。
　　 本文對長梗山龍眼組織培養(yǎng)中的無菌發(fā)芽、啟動培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、幼芽伸長生長，及播種繁殖中打破種子休眠、栽培管理技術(shù)等進(jìn)行了研究。在試驗過程中，取得了一些階段性成果，為進(jìn)一步研究奠定了基礎(chǔ)。研究

2、的具體結(jié)果如下：
　　 1.組織培養(yǎng)
　　 (1)在進(jìn)行消毒、滅菌處理方法試驗時，得出采用75％的酒精處理種子30s、后用0.1％升汞處理10min，可以較好的降低污染率。以莖段作外植體，75％的酒精處理30s后用0.1％升汞處理的最佳滅菌時間為8min。
　　 (2)長梗山龍眼種子無菌發(fā)芽試驗中，用250mg/LGA3浸泡種子24h，并且在培養(yǎng)基中加入1nig/LGA3，發(fā)芽率最高，為41.1％；種子在固體培養(yǎng)

3、基上的發(fā)芽率比在以紙橋為載體的培養(yǎng)基上高1.7％，液體培養(yǎng)基在發(fā)芽時間上較固體培養(yǎng)基短，變溫培養(yǎng)并且利用250mg/LGA3浸泡種子24h可以較好的提高種子發(fā)芽率。
　　 (3) WPM為比較適合長梗山龍眼繼代培養(yǎng)的基本培養(yǎng)基，6-BA和NAA為比較適合長梗山龍眼增殖培養(yǎng)的細(xì)胞分裂素和生長素。
　　 (4)啟動培養(yǎng)中最佳外植體為頂芽，最適合啟動培養(yǎng)基為1/2MS+KT1.0mg/L+NAA0.01mg/L+蔗糖20g/L

4、；采用無菌苗誘導(dǎo)叢芽最佳培養(yǎng)基為1/2MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.01mg/L+蔗糖20g/L。在培養(yǎng)基中添加0.3％的活性炭或5mg/L的維生素C可緩解褐化。
　　 (5)在愈傷組織的誘導(dǎo)培養(yǎng)中，誘導(dǎo)愈傷組織子葉比葉片和莖段效果好，最適培養(yǎng)基為1/2MS+6-BA1.0mg/L+2，4-D1.0mg/L+蔗糖20g/L。愈傷增殖培養(yǎng)基為1/2MS+6-BA0.5mg/L+NAA2mg/L+蔗糖20g/L。
　

5、　 (6)在進(jìn)行叢芽增殖培養(yǎng)正交試驗后得出以WPM為基本培養(yǎng)基，向其中添加6-BA1.5mg/L、NAA0.01mg/L、蔗糖25g/L有利于叢芽增殖，向其中添加6-BA1.5mg/L、NAA0.01mg/L、蔗糖20g/L則有利于芽苗的伸長生長。
　　 (7)30天應(yīng)為長梗山龍眼比較合適的繼代培養(yǎng)周期。
　　 2.播種繁殖
　　 在進(jìn)行長梗山龍眼的栽培技術(shù)研究過程中發(fā)現(xiàn)，分別用煙絲水、CaCl2、赤霉素及草木

6、灰的不同濃度浸泡種子24h，能提高種子發(fā)芽率，發(fā)芽率高了對照，處理間差異顯著，并且以100mg/LCaCl2溶液浸泡種子24h，能顯著提高發(fā)芽率至36％；沙層積種子2個月能打破長梗山龍眼種子休眠，發(fā)芽率達(dá)到22％，但仍舊偏低，需進(jìn)一步改進(jìn)方法。長梗山龍眼苗齡3個月的幼苗移栽成活率為97.9％，苗齡6個月的小苗移栽成活率為82％，移栽對出新葉無明顯影響。剪去長梗山龍眼10cm的枝梢促發(fā)側(cè)枝平均5.6枝，2個月后主干地徑增粗0.2cm，修剪