新型真菌源激活蛋白的分離純化及生物功能的研究.pdf

1、激活蛋白(Activator Protein)是一類源于真菌的新型蛋白激發(fā)子，前期研究發(fā)現該蛋白激發(fā)子具有誘導植物抗性和促進植物生長的作用。激活蛋白是一類新型的生物農藥，具有廣譜高效、多功能和無殘留的特點。本文研究了病原真菌的培養(yǎng)與激活蛋白的純化、對植物生長及其生理活性的影響。測定了不同濃度激活蛋白處理對作物生理特性的影響及其經激活蛋白處理后，植物的纖維素酶活性，過氧化氫和脯氨酸的含量，從而研究其作用機理，為進一步的商業(yè)化生產起到一定的

2、作用。 1、病原真菌的培養(yǎng)與激活蛋白的純化本實驗室保存的稻瘟菌在液體PDA培養(yǎng)基中振蕩培養(yǎng)后，抽提蛋白，利用硫酸銨沉淀法將粗蛋白沉淀，后利用酒精沉淀蛋白一次，利用FPLC高效蛋白純化系統(tǒng)進行蛋白純化，通過離子交換層析、疏水層析和分子篩連用的方法獲得了純化的該蛋白。實驗證明，用pH7.5的MES緩沖液條件下獲得的初步純化的該蛋白。將上述蛋白樣品過分子篩后獲得的單峰為純化蛋白。利用固相梯度凝膠電泳獲得該蛋白的等電點，實驗證明該蛋白的

3、等電點為4.314±0.035，是一種酸性蛋白。 2、為探討真菌源激活蛋白在促進作物生長方面的效果，研究了不同濃度激活蛋白處理對多種作物的影響。試驗結果表明，用2～3 μg/mL的新型激活蛋白浸泡棉種6h，能顯著提高種子的發(fā)芽勢和發(fā)芽率。番茄和絲瓜種子分別用1μg/ml的蛋白浸種6h，能顯著提高種子的發(fā)芽率。黃瓜種子用500倍和1000倍液都能顯著提高種子的發(fā)芽率。為探討真菌源激活蛋白對大田作物的效果，研究了不同濃度激活蛋白處理

4、對油桃、大蒜、冬棗的影響。結果表明，用1000-1500倍液在大田中就可有良好的效果。 3、為探討真菌源激活蛋白在促進植物生長和增產方面的作用機理，研究了不同濃度激活蛋白處理對大豆幼苗生理特性的影響。結果表明，經1、2、5 μg/mL激活蛋白處理后第7d，大豆幼苗根系活力比對照分別增加了44.2％、54.5％和19.8％，硝酸還原酶活性比對照分別增加了61.33％、138.37％和53.2％。 4、研究表明，稻瘟菌激活蛋