七氟烷預處理和后處理對離體大鼠心臟再灌注心律失常和心肌細胞電生理的影響.pdf

1、目的：
　　 1、觀察七氟烷預處理（Sevoflurane preconditioning，SpreC）和七氟烷后處理(Sevoflurane postconditioning，SpostC)對再灌注心律失常的影響，探索其相關(guān)機制；
　　 2、觀察SpreC和SpostC對離體大鼠心肌細胞動作電位、L型鈣通道電流(L-type calcium current，ICa,L)、快鈉通道電流（Fast sodium curre

2、nt，INa）和瞬時外向鉀通道電流(Transient outward potassium current，Ito)電生理特性的影響及相關(guān)機制；
　　 3、比較SpreC和SpostC對再灌注心律失常和離子通道電生理作用的異同。
　　 方法：
　　 1、取40只SD大鼠心臟建立Langendorff灌注模型，KH液平衡15min后隨機分入以下4組，每組10只：
　　 (1)時間對照組（Time Contr

3、ol，TC），平衡期后繼續(xù)灌注KH液75min；
　　 (2)缺血再灌注組(Ischemia/reperfusion，I/R)，平衡期后灌注KH液20min，隨后停灌25min復灌30min制作全心缺血再灌注損傷模型；
　　 (3)七氟烷預處理組(SpreC)，在全心停灌前以3％七氟烷預處理15min，普通KH液洗脫Smin，隨后停灌25min，復灌30min；
　　 (4)七氟烷后處理組(SpostC)，平衡期

4、后灌注普通KH液20min，停灌25min，復灌30min，在復灌之初使用3%七氟烷后處理15min。
　　 比較各組血流動力學、冠脈流出液肌鈣蛋白I、心肌梗死面積、再灌注心律失常及細胞內(nèi)鈣離子和活性氧水平。
　　 2、取SD大鼠心臟制備Langendorff灌注模型，分組及缺血再灌注方案同第一部分，再灌注結(jié)束后分離各組心室肌外膜細胞進行電生理實驗。使用標準的全細胞膜片鉗技術(shù)記錄各組心室肌細胞的動作電位振幅、靜息膜電位和

5、動作電位時程；記錄各組心室肌細胞的Ica,L、INa、Ito，分析其電流一電壓曲線、穩(wěn)態(tài)激活曲線、穩(wěn)態(tài)失活曲線和穩(wěn)態(tài)失活后恢復曲線的變化，以了解SpreC和SpostC對大鼠心室肌細胞電生理特性的影響。
　　 結(jié)果：
　　 1、血流動力學、心肌損傷和再灌注心律失常相關(guān)結(jié)果。與I/R組相比，SpreC組和SpostC組能增大再灌注心臟的左室發(fā)展壓、左室最大收縮／舒張速率和心率，降低左室舒張末期壓力，降低冠脈流出液肌鈣蛋白I

6、水平，減少心梗面積(P＜0.05)。SpreC和SpostC減少離體心臟再灌注期間VPB的發(fā)生個數(shù)、減少VF的發(fā)生率、縮短VT和VF的發(fā)作時程、降低再灌注心律失常評分(P＜0.05)。SpreC和SpostC降低再灌注后心肌細胞內(nèi)鈣離子水平和活性氧水平(P＜0.05)。SpreC和SpostC在上述指標的差異未見統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 2、心肌細胞電生理相關(guān)結(jié)果。
　　 (1)動作電位：與TC組相比，I/R組

7、的心肌細胞動作電位振幅減小、靜息膜電位升高、動作電位時程縮短(P＜0.05)。與I/R組相比，SpreC和SpostC能增大動作電位振幅、降低靜息膜電位、延長動作電位時程（P＜0.05=。
　　 (2)L型鈣通道：與TC組相比，I/R組ICa，L的峰值密度降低，半失活電壓減小，失活曲線左移，恢復時間常數(shù)增大(P＜0.05=。與I/R組相比，SpreC和SpostC能增加ICa，L的峰值密度，增加ICa，L失活曲線的半失活電壓，右

8、移失活曲線，降低ICa．L恢復曲線的時間常數(shù)(P＜0.05)。
　　 (3)快鈉通道：與TC組相比，I/R組INa的峰值密度降低，穩(wěn)態(tài)失活曲線的斜率因子κ降低(P＜0.05=。與I/R組相比，SpreC和SpostC能增加INa的峰值密度，增加失活曲線的斜率因子k(P＜0.05)。
　　 (4)瞬時外向鉀通道：與TC組相比，I/R組Ito的峰值密度降低，半激活電壓和半失活電壓增大，穩(wěn)態(tài)激活曲線和穩(wěn)態(tài)失活曲線右移(P＜0.

9、05)。
　　 與I/R組比較，SpreC和SpostC能增加Ito的峰值密度，減小半失活電壓，左移失活曲線(P＜0.05)。SpreC和SpostC關(guān)于動作電位、ICa,L、INa和Ito相關(guān)指標之間的差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1、SpreC和SpostC能改善缺血再灌注心臟的血流動力學，減輕心肌損傷，減少心肌梗死面積，對離體大鼠心臟發(fā)揮保護效應。SpreC和SpostC能改善離體

10、大鼠再灌注心律失常的發(fā)生及發(fā)作。上述作用可能與SpreC和SpostC降低心肌細胞內(nèi)鈣離子和氧自由基水平有關(guān)。
　　 2、(1)SpreC和SpostC能減小缺血再灌注損傷對動作電位參數(shù)的影響。
　　 (2)SpreC和SpostC能增加ICa，L峰值密度，加快失活，減慢恢復，緩解缺血再灌注損傷造成的變化，提示SpreC和SpostC有利于延長再灌注損傷后心肌細胞的動作電位時程，緩解心肌復極離散度的增大。此外，SpreC

11、和SpostC對L型鈣通道的調(diào)控有利于維持鈣穩(wěn)態(tài)，緩解再灌注損傷后鈣超載。
　　 (3)SpreC和SpostC能增加再灌注損傷后INa的峰值密度，提示SpreC和SpostC能增加再灌注損傷心肌細胞動作電位的0相上升速率，加快沖動傳導，對興奮性折返性心律失常有一定的預防作用。
　　 (4)SpreC和SpostC能增加再灌注損傷心肌細胞Ito的峰值密度，降低半失活電壓，加快失活過程，能減少缺血再灌注損傷對動作電位時程的