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文檔簡介
1、目的:
通過實驗觀察水蛭素經盆腔內灌注對輸卵管炎性阻塞性不孕大鼠模型輸卵管病理改變及BcL-2、EGFR表達的影響,探討其作用機制,為治療輸卵管炎性阻塞性不孕提供新的思路及理論依據(jù)。
方法:
采用潔凈型健康未孕SD雌性大鼠100只,隨機分為正常對照組20只、剩余80只用混合細菌接種法注入大鼠輸卵管復制炎性阻塞性模型。造模20天后,將剩余的65只(因造模過程中死亡11只和解剖4只)隨機分為三組,即模型組21只
2、、杏香兔耳風組22只、水蛭素組22只。在同等條件下飼養(yǎng),造模第20天開始盆腔灌注給藥,正常對照組和模型組盆腔灌注適量生理鹽水。每組又分為兩個時間組(15天、30天)。分別在灌注給藥后第15天和第30天隨機處死各組大鼠(6-9只)取材,肉眼觀察用藥前后及不同組別輸卵管的大體形態(tài)變化,HE染色觀察輸卵管組織形態(tài)學變化,免疫組化檢測輸卵管上皮細胞BcL-2、EGFR的表達。剩余大鼠各組4-5只停止給藥觀察受孕情況。
結果:
3、 1.混合細菌接種法注入輸卵管復制炎性阻塞性模型,于造模第5、10、15、20天隨機抽取大鼠輸卵管組織,肉眼及HE染色觀察確認造模20天模型復制成功。
2.經盆腔灌注治療后觀察大鼠輸卵管情況,與模型組比較,水蛭素組和杏香兔耳風組能不同程度對模型大鼠輸卵管組織形態(tài)學進行改善。
3.大鼠輸卵管上皮細胞漿內BcL-2的表達:BcL-2在正常組大鼠輸卵管上皮細胞中不表達,在模型組中表達明顯,兩組比較差異有顯著統(tǒng)計學意(P<0
4、.01);與模型組比較,杏香兔耳風組和水蛭素組均能不同程度的抑制模型大鼠輸卵管上皮細胞BcL-2的表達(P<0.05)。
4.大鼠輸卵管上皮細胞膜上EGFR的表達:EGFR在正常組大鼠輸卵管上皮細胞中呈少量陽性表達,在模型組中表達明顯增強,兩組比較差異有顯著性(P<0.01);與模型組比較,杏香兔耳風組和水蛭素組均能不同程度的抑制模型大鼠輸卵管上皮細胞EGFR的表達(P<0.05)。
5.治療15天與30天后比較:①
5、BcL-2各組兩時間段之間進行兩兩比較,正常組、模型組差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05),水蛭素組和杏香兔耳風組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);②EGFR各組兩時間段進行兩兩比較,正常組、模型組、差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05);水蛭素組和杏香兔耳風組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
6.觀察盆腔灌注治療30天后大鼠受孕情況,模型組受孕率為20%,比正常組顯著下降,治療后各組受孕率均有所提高,水蛭素組與杏香兔耳風組比較無
6、統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
結論:
1.混合菌接種法可成功制作大鼠輸卵管炎性阻塞模型。
2.水蛭素經盆腔灌注后能明顯減輕大鼠輸卵管炎癥,提高受孕率;給藥30天效果好于給藥15天。
3.水蛭素經盆腔灌注給藥后能抑制模型大鼠輸卵管上皮細胞BcL-2蛋白和EGFR蛋白的表達,促進炎癥細胞及其他增生細胞凋亡,調節(jié)細胞生長,促進受損組織修復,從而發(fā)揮抗炎作用,這可能是治療輸卵管炎性阻塞性不孕的作用機制之一
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