MYB類基因PAP1轉(zhuǎn)化百合的研究.pdf

1、海南大學(xué)碩士學(xué)位論文MYB類基因PAP1轉(zhuǎn)化百合的研究姓名：李剛申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：作物遺傳育種指導(dǎo)教師：金志強20080501A b s 仃a c tL i l yi so r 圮o f t l l en 1 1 優(yōu)i I n p o n a n t b u l bn o w e 墻，w K c h i sp o p u l 盯f o r 蓼a c e m lp o s t u r e孤1 ds 協(xié)o n gs c a p e ．

2、A so n e o f t l l e 船r eo m a m e n t m ，i t i s 馴眈l b l ef o ri n t c r s p e r s i I 培n l eg a r d c na n d 丘．e s hc u t t i n gf l o w e 璐．N o w a d a y s t l l ec o l o r o f L i l y h o 、張V e r i sc o m p a r a t i

3、 v e l ys i n g l e n e s s ，m o s u y a r e 、^ 粗t ea n dp i r l k ' Ⅵ舡c ha 儂娥i t s c o m m e r C i a lV a h 圯．1 1 1 l l st h i sm l I 蚵f o c 哪e do nm e i r n p r 0 V e m e n t o f l i l yn o w 口’sc o l o rb y g e r

4、I e t i ce I l g i I l e e f i I 塢t e c l l I l i q u e ．M Y B 仃觚s c r i 塒o n 觸0 r 以P Jh a db e e ni s o l a t e d 舶m 彳朋6 池p 捃g e ∞m i cD N A a c c o r d i n gt ot h es e q u e m eo f 剛尸J c D N A ( △￡蘭2 5 1 2 3 ) w l l i

5、 c h 、Ⅳ嬲1 3 7 6 b p 觚dl l a d 9 9 ．7 ％h o m o l o g 謝血t h a tr 印o r “沮i nN C B I ．乒刪d y z e db yS p i d e y s o f t ，以尸Ji n c l u d e dt w oi n t r o n s ，t h r e e e x t r o n s ，a ni 1 1 ：t e 伊a t e dO R F ( 0 p e n r

6、e a d m g 自m l e ) a n de n c o d i I l g2 4 8 a I I l ：i 1 1 0 a c ：i d S ．A n a l y z e db y P r i m e rs o f t ，t h e r ew a sa 勛P ，s i t ea tt h e5 7 l b p o f 只4 尸J c D N A ，w h i c hw a s c o n s i s t e n tw i t h

7、t h er 印o r t e ds e q u e I Ⅺc e ；A n a l y z e db yG e n s c a ns o f t ，廿1 er e 砌ti l l d i c a t c d ．Ⅱ埝t 劇P Jh a da t y p i c a lD N A b i n d i n gd o m a i n o fM Y B 仃a 璐c r i p t i o n f a c t o r ’w 1 1 i c h 砌

8、i c a ：t I e dt h a t 以P J ’sc l o n ew a s c o r r e c t ．O Ⅲl a b o r a t o 巧h a v es u C c e e d e di l l c l o I l i l l gn o w e r ．S p e c i 6 ce X p r c s s i o np r o m o t e rP C H S舶m 彳陽6 砒筘捃g e ∞m i c D N A ．P

9、 l 趾t e x p r e s s i o nv c 咖r p P C H S P A P 1w 弱c o n 舭d b yi I l S e 池g 剛尸Jt 0 舭d o W n s 仃e 鋤o f P C H S i np P C H S ，w h e r e 恤G 啷g e n e 、糯r e p l ∞e db y 尉P - f ．p P C H S P A P 1 Ⅷ略仃鋤s f 0 】m e di n t 0 工訂f “

10、m 工D 餾穢％，．“ m 誦也m e t w ．0 一s t e pe X p l a n tm e t h o dw l l i c hc r e a t e d b yo u rl 秈r 咖Ⅸ1 k 仃a I l s f o m a t i o ne 伍c i e n c yc o u l db ei I l c r e 舔e db ys u p p l y i I l g2 5 0m g ／LA S ．T h eL i l y

11、仃a 船f 0 衄e d 伊e w w e n o ns o l i dc u l t u r em e d i 眥c 0 盥【i 訛d 謝t l l M s + 1 ．O m g ／L6 ．B A + 0 ．1m g ／LN 礎(chǔ)¨2 5 0 m g ／L C e f 0 + 5 0m g ／L G 4 1 8 ．1 kr c s i s t 鋤t b l l d sr e g e n e r a t e d r 0 0 to

12、 n s o l i dc u l t u r em e d i u m c o 璐意i t u t e d 誠t l l1 ／2M S + O ．2 5 m g／LI B A + 2 5 0 m g ／L C e f 0 + 5 0m g ／LG 4 1 8 ．1 1 5G 4 1 8 r e s i s t 躚t p l a n t l e t sw e r co b t 婦d i I l t h i s唧e 血n e 咄6 0 G

13、 洱1 8 r e s i s t a n t p l a n t l e t Sw 嬲r a u 舶n d ye x 廿硪d f 6 r P C R ．T h e r e s u l t Sm d i c a t | e d 也a t9 w 弱p o s i t i v e ．3p l 鋤t sw 孫豫疵I o m l y e ) 【t m t e df o rS o 眥m b l o t 鋤m y s i s ，2p l 鋤t sh

14、 a dc r o s s b r e e ds i 孕1 a l s ．nw 弱i n d i c a ：t e dt h a t 也ef o r e i g ng e n ek I db e e ni n t e 繆砒e di l 喲L i l y ’sg e n o m e ．T h ea c M e V e m e n to f 臺a u E 噶g e n e t i c p l 鋤t s 、Ⅳ0 u l d p r o v i

15、 d e as c i e n t i f i c b a s i s f ．o r 也e仃趾s f o 珊a t i o n o fp r o m o t e rP C H S 鋤d 仃娜c r i p t i o n 觚0 r 烈尸Ji r l t 0 礎(chǔ)e ro m { l I n e n t a ln o w e r sa n dm a d eas o l i df o m l d a ：t i o n f o rd e V e