羊泰勒蟲核苷酸合成代謝途徑初步分析及OPRT蛋白的免疫保護試驗.pdf

1、羊泰勒蟲病是由媒介蜱傳播的泰勒科泰勒屬的原蟲寄生于綿羊和山羊的巨噬細胞、淋巴細胞和紅細胞內而引起的疾病的總稱，它給全球養(yǎng)羊業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟損失。本研究運用生物信息學初步分析了羊泰勒蟲蛋白組的核酸合成代謝路徑，進行了乳清酸磷酸核糖轉移酶(OPRT)基因的克隆表達，以及rOPRT的綿羊保護性效果評價。其研究結果如下:
　　1.對尤氏泰勒蟲、呂氏泰勒蟲兩個種的六個地方株的蛋白組進行核苷酸代謝途徑初步分析，用COG的聚類分析結果表明，與

2、核苷酸代謝相關的蛋白有5個，其中4個參與從頭合成途徑，只有一個參與補救途徑。其中乳清酸磷酸核糖轉移酶、腺苷酸激酶分別為從頭合成途徑、補救途徑的關鍵酶，具有重要的研究意義。
　　2.克隆和表達了尤氏泰勒蟲oprt基因的功能區(qū)片段，并對重組蛋白rOPRT的反應原性進行分析。結果表明oprt基因的表達產(chǎn)物為包涵體蛋白，rOPRT除與尤氏泰勒蟲陽性血清反應外，也與呂氏泰勒蟲和綿羊泰勒蟲陽性血清發(fā)生交叉反應。證實oprt同源基因也存在于呂氏

3、泰勒蟲和綿羊泰勒蟲。
　　3.動物保護性實驗完成了rOPRT對綿羊免遭尤氏泰勒蟲感染的保護效果評估。結果表明，對照組綿羊發(fā)燒持續(xù)時間明顯長于免疫組，與對照組相比，免疫組綿羊帶蟲期明顯縮短。對照組實驗綿羊分別在攻蟲血后第25天、26天、29天出現(xiàn)高蟲血癥，而免疫組則分別出現(xiàn)在第26天、32天和33天，明顯比對照組出現(xiàn)的晚。血紅蛋白含量測定的結果顯示，對照組的血紅蛋白含量(Hb)顯著下降，而實驗組Hb變化較小。同時紅細胞計數(shù)和臨床癥狀