SD大鼠L2移位修復(fù)骶叢撕脫傷的實驗研究.pdf

1、隨著現(xiàn)代工業(yè)和交通的發(fā)展，人們的旅行速度越來越快，嚴(yán)重的交通傷害和工業(yè)傷害也增加了起來。這其中不乏嚴(yán)重的骨盆骨折。由于骨盆骨折等所導(dǎo)致的骶叢神經(jīng)根性撕脫傷（腰4，腰5及骶1-4）也隨之而來。對于骶叢撕脫傷的治療，目前并無十分有效的手段。長期以來，業(yè)界對于骶叢撕脫傷的治療一直采取保守療法1。近年來，有少數(shù)學(xué)者嘗試采用外科方法治療2,3，采用的方法主要是對骶叢神經(jīng)進行探查，如有可能，也進行原位的殘端吻合，這種情況下，患者的恢復(fù)非常有限。陳愛

2、民等提出采用健側(cè)的骶1神經(jīng)根作為新的動力源神經(jīng)移位修復(fù)骶叢撕脫傷，并初步證實其作為動力源神經(jīng)治療的安全性和部分有效性4。但是臨床上的骶叢損傷患者一般是多根神經(jīng)根同時受損，而單一的骶1神經(jīng)根僅能修復(fù)一支神經(jīng)根。所以，我們需要更多的動力源神經(jīng)來同時進行骶叢損傷的修復(fù)，才有望提高恢復(fù)水平。腰叢作為動力源神經(jīng)已經(jīng)應(yīng)用于脊髓損傷后的膀胱功能重建5，且由于腰神經(jīng)根在后路比較容易暴露，和骶叢位置鄰近，手術(shù)創(chuàng)傷相對小，課題組在對大鼠解剖結(jié)構(gòu)參數(shù)觀測的基

3、礎(chǔ)上，已成功建立骶叢撕脫傷模型，通過術(shù)后觀察大鼠的生存率、大鼠行為學(xué)觀察及電生理檢測來判斷L2作為動力源神經(jīng)的安全性。通過行為學(xué)觀察，電生理檢查、肌肉的濕重對比、電鏡觀察并結(jié)合肌肉橫斷面免疫組化判斷神經(jīng)根移位術(shù)后神經(jīng)再生情況，證實其有效性。通過造模術(shù)后大鼠一般情況觀察、肌肉的濕重比，電鏡觀察、結(jié)合肌肉橫斷面免疫組化，脊髓前角運動細(xì)胞元凋亡等指標(biāo)綜合分析骶叢撕脫傷后靶肌肉退變規(guī)律。
　　 第一部分腰2神經(jīng)根作為動力源神經(jīng)的安全性研

4、究
　　 目的:了解切取單根腰2神經(jīng)根對一側(cè)肢體的影響，以及術(shù)后靶細(xì)胞退變規(guī)律的研究。
　　 方法:選取60只成年SD大鼠，雌雄不限，不打開椎管，在椎體神經(jīng)孔外側(cè)切斷右側(cè)腰4-腰6神經(jīng)根，術(shù)后通過體感誘發(fā)電位來進行篩選，剔除造模不成功的大鼠，另取大鼠造模補足數(shù)量。將造模成功的大鼠分為3組，第一組為假手術(shù)對照組;第二組將大鼠的健側(cè)腰2在椎管外切斷;第三組將大鼠健側(cè)腰2及腰6同時在椎管外切斷。術(shù)后觀察三組大鼠的一般情況，生存

5、率，進行行為學(xué)觀察和測試以及電生理檢查。
　　 結(jié)果:1、一般情況:術(shù)后16周，三組大鼠分別存活19只、18只、18只;2、16周時三組大鼠左側(cè)BBB評分分別為10.92±3.14、10.69±3.29、10.38±3.77;3、第一組及第二組大鼠均未發(fā)現(xiàn)有健側(cè)肢體潰瘍和自噬現(xiàn)象，第三組有一只大鼠出現(xiàn)輕微的足底潰瘍，后愈合。
　　 結(jié)論:以腰2神經(jīng)根作為動力源神經(jīng)是安全可靠的，但是同時采用健側(cè)的腰2及腰6神經(jīng)根作為動力源

6、神經(jīng)可能會在早期有個別的出現(xiàn)難以代償?shù)氖窠?jīng)現(xiàn)象。
　　
　　 第二部分利用腰2修復(fù)骶叢撕脫傷的實驗研究
　　 目的:探討采用腰2作為動力源神經(jīng)修復(fù)骶叢撕脫傷的有效性。
　　 方法:選用體重200-300g的成年SD大鼠共90只，雄雌不限，進行右側(cè)骶叢撕脫傷造模，術(shù)后通過SEP健側(cè)剔除造模不成功的大鼠，另取大鼠造模補足數(shù)量。將大鼠隨機分為三組，分別為假手術(shù)組、健側(cè)腰2-傷側(cè)腰6吻合組、健側(cè)腰6-傷側(cè)腰6吻

7、合組。術(shù)后觀察各組大鼠的存活情況，對大鼠進行BBB評分;雙側(cè)股二頭肌、小腿三頭肌及脛前肌稱重對比濕重及肌肉橫截面HE染色的對比;電鏡檢查吻合口遠(yuǎn)端神經(jīng)生長情況;肌電圖檢查以評價吻合的有效性。
　　 結(jié)果:術(shù)后12周BBB評分顯示，兩吻合組得分均高于假手術(shù)組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，兩吻合組之間無明顯差異。吻合組患側(cè)的脛前肌、小腿三頭肌及股二頭肌與不吻合組比較，有明顯的恢復(fù)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。吻合組內(nèi)三組肌肉尤其以股二頭肌恢復(fù)為佳。

8、r>　　 結(jié)論:健側(cè)腰2神經(jīng)根移位是能夠有效的進行骶叢撕脫傷修復(fù)的動力源神經(jīng)，能夠解決由于無法找到神經(jīng)根殘端而無法修復(fù)的困難或者動力源神經(jīng)不足時候的有效補充。
　　
　　 第三部分大鼠單側(cè)骶叢撕脫傷后靶肌肉退變規(guī)律的研究
　　 目的:研究單側(cè)骶叢撕脫傷后靶肌肉的退變規(guī)律。
　　 方法:選用體重200-300g的成年SD大鼠60只，雄雌不限，建立單側(cè)骶叢撕脫傷模型，。分別于損傷后2周，4周，6周，8周，

9、10周，12周取大鼠兩側(cè)的小腿三頭肌，測量肌肉濕重、肌細(xì)胞直徑及肌肉橫截面積及觀察運動終板形態(tài)。
　　 結(jié)果:在肌肉失神經(jīng)支配后，肌肉濕重、肌細(xì)胞直徑及肌肉橫截面積均下降，其中肌細(xì)胞直徑及肌肉橫截面積均呈進行性下降過程，而肌肉濕重呈現(xiàn)前快后慢的下降過程。在4周內(nèi)，運動終板無明顯變化，4周后，其邊緣開始變得模糊，進而消失，12周基本很難找到。
　　 結(jié)論:肌肉濕重、肌細(xì)胞直徑及肌肉橫截面積均出現(xiàn)下降，運動終板在4周后開始逐

10、漸消失。
　　
　　 第四部分骶叢撕脫傷修復(fù)后中樞重建規(guī)律的研究
　　 目的:研究單側(cè)骶叢撕脫傷健側(cè)腰2移位后中樞重建規(guī)律。
　　 方法:選用體重200-300g的成年SD大鼠30只，雄雌不限，將其隨機分為3組:第一組:右側(cè)骶叢撕脫傷損傷不修復(fù)組，為陰性對照組，10只;第二組:健側(cè)L2神經(jīng)根移位修復(fù)組，10只;第三組:假手術(shù)組，不做特殊處理，10只。術(shù)后4個月，大鼠禁食12小時，尾靜脈注射0.2ml18