油酸致大鼠急性呼吸窘迫綜合征機制及丹參多酚酸鹽對其影響研究.pdf

1、目的：本實驗應(yīng)用油酸致大鼠急性呼吸窘迫綜合征(Acute respiratory distress syndrome，ARDS)模型，觀察大鼠肺濕/干比值(wet weight/dry weight，W/D)及肺組織病理變化，并通過檢測血清中心房鈉尿肽(Atrial natriuretic peptide，ANP)、B型腦鈉肽(B-type natriuretic peptide，BNP)和肺組織中丙二醛(Malondialdehyde

2、，MDA)的含量及超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，SOD)、Na+–K+–ATP酶(Na+–K+–adenosine triphos phatase，NKA)活性的變化，觀察丹參多酚酸鹽干預(yù)對ARDS部分檢測指標(biāo)的影響，同時探討丹參多酚酸鹽治療作用的可能機制。為臨床治療ARDS提供線索。
　　方法：
　　1.將200-250g重量的清潔級SD成年大鼠30只隨機分為對照組、油酸組及丹參多酚酸鹽組，每組

3、10只，雌雄不拘。對照組在左下腹注射1.0g/kg烏拉坦進行腹腔麻醉，進入麻醉狀態(tài)后進行手術(shù)。逐層分離至股靜脈，插入靜脈管10分鐘內(nèi)注入4.1ml/kg的生理鹽水。油酸組以相同方法進行腹腔麻醉、分離靜脈及股靜脈插管，注射0.1ml/kg的油酸，10分鐘內(nèi)注入4.0ml/kg的生理鹽水，建立ARDS模型。丹參多酚酸鹽組以相同的方法制作大鼠油酸致ARDS模型后，靜脈注入30mg/kg丹參多酚酸鹽，并注入1ml/kg的生理鹽水。
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4、.術(shù)畢等待3個小時，經(jīng)股動脈采集的血液，并提取血清，放入-40℃冰箱凍存，準(zhǔn)備ELISA法檢測血清中ANP、BNP含量。
　　3.處死動物，開胸肉眼觀察肺組織形態(tài)學(xué)變化。取出左肺稱其濕重、干重(將左肺置于70℃恒溫箱48h,使肺組織完全脫水后稱重)，剪下余肺葉，部分放入-70℃凍存，準(zhǔn)備以生化法檢測MDA含量及SOD、NKA活性。另一部分放入固定液固定，待制備光鏡標(biāo)本及電鏡標(biāo)本。
　　結(jié)果：
　　1.濕/干比重及生化指

5、標(biāo)：與對照組比較，丹參多酚酸鹽組、油酸組的左肺濕/干重比值升高，有顯著差異(p<0.01)，血清中ANP、BNP含量及肺組織中MDA含量顯著升高，有顯著差異(p<0.01)，肺組織中SOD、NKA含量與對照組相比明顯下降，有顯著差異(p<0.01)；與油酸組比較，丹參多酚酸鹽組左肺濕/干重比值下降，有顯著差異(p<0.01)，血清中ANP、BNP含量及肺組織中MDA含量有所下降，有顯著差異(p<0.01)，肺組織中SOD、NKA含量有所

6、升高，有顯著差異(p<0.01)。
　　2.血清中ANP、BNP及肺組織MDA、SOD、NKA的含量與相應(yīng)的左肺濕干重比值存在相關(guān)性(p<0.01)，肺組織MDA、SOD的含量與肺組織NKA含量存在相關(guān)性(p<0.01)，肺組織測量指標(biāo)和血清測量指標(biāo)存在相關(guān)性(p<0.01)。
　　3.HE染色光學(xué)顯微鏡形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果：油酸組部分肺泡及肺間質(zhì)細(xì)胞核濃縮、核溶解及核碎裂，肺間質(zhì)增厚，大片的肺泡萎縮，肺泡腔內(nèi)見大量滲出性蛋白水腫

7、液、中性粒細(xì)胞、紅細(xì)胞，病變較輕部位可見透明膜形成，肺間質(zhì)明顯增厚、水腫，可見中性粒細(xì)胞浸潤，毛細(xì)血管周圍可見套狀水腫；丹參多酚酸鹽組有以上改變，但與油酸組比較病變輕，且可見泡沫樣細(xì)胞；對照組無此現(xiàn)象。
　　4.電子顯微鏡形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果：油酸組肺泡I型上皮細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的疏松、腫脹、壞死。肺泡Ⅱ型細(xì)胞損傷較I型細(xì)胞嚴(yán)重，肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞板層小體可見變性破壞及排空現(xiàn)象，可見大小不等的空泡，局部肺不張板層小體排空明顯。丹參多酚酸鹽

8、組有以上改變，但與油酸組相比病變輕，對照組無此現(xiàn)象。
　　結(jié)論：
　　1.急性呼吸窘迫綜合征肺組織MDA含量，肺組織SOD、NKA活性，血清中ANP、BNP含量可反映肺組織損傷程度。
　　2.肺組織MDA含量與肺組織NKA活性存在負(fù)相關(guān)，提示MDA可能使NKA生成減少或促進滅活。
　　3.血清中ANP、BNP含量與W/D呈正相關(guān)性，與NKA呈負(fù)相關(guān)性，提示可能反映肺水腫程度。
　　4.血清中ANP、BNP含