圍產(chǎn)期服用OMEGA-3多不飽和脂肪酸改善七氟烷導(dǎo)致的新生大鼠神經(jīng)退行性病變和記憶損害.pdf

1、近年來許多動物實驗發(fā)現(xiàn)，新生動物吸入七氟烷等麻醉氣體能導(dǎo)致神經(jīng)細胞的凋亡，影響神經(jīng)細胞的增生和分化，從而損害神經(jīng)認知功能。OMEGA-3多不飽和脂肪酸作為一類重要的不飽和脂肪酸，在腦內(nèi)含量極為豐富，在維持腦的結(jié)構(gòu)和功能上具有極為重要的作用。以往的實驗發(fā)現(xiàn)，OMEGA-3多不飽和脂肪酸具有抗凋亡，抗氧化和改善神經(jīng)發(fā)生的作用。本實驗將觀察七氟烷是否能對未成熟腦產(chǎn)生明顯的神經(jīng)毒性作用，且圍產(chǎn)期服用含豐富OMEGA-3多不飽和脂肪酸的魚油是否能

2、改善七氟烷導(dǎo)致新生大鼠的神經(jīng)毒性和認知損害。
　　斯普拉格-杜勒(SD)孕鼠（每組3只）從懷孕第二天（懷孕期）開始到分娩后14天（哺乳期）服用含魚油或不含魚油的食物。其新生大鼠在出生后第7天給予吸入麻醉藥七氟烷干預(yù)（母鼠沒有魚油干預(yù)，新生鼠也沒有進行七氟烷干預(yù)的為對照組）。每組的新生大鼠在麻醉剛開始的時候和麻醉后持續(xù)3天內(nèi)定時腹腔注射BrdU，以評估海馬區(qū)的神經(jīng)增生。其后每組新生大鼠在指定的時間分別取腦組織和灌注固定，冰凍切片。各

3、組在麻醉后3小時（每組3只）用流式細胞術(shù)的方法分析各組細胞活性氧(ROS)的相對水平;在麻醉后18小時進行用免疫蛋白印記的方法和免疫熒光的方法檢測腦組織內(nèi)活化型半胱天冬酶-3(cleavedcaspase-3)的變化;在麻醉后3天觀察各組BrdU的含量。剩余新生大鼠（每組9只）則分別在出生后5周，9周和10周的時候行莫里斯(Morris)水迷宮空間學(xué)習(xí)記憶、場景恐懼實驗和莫里斯水迷宮強化記憶實驗。
　　實驗發(fā)現(xiàn)，3％七氟烷6小時持

4、續(xù)吸入能導(dǎo)致新生大鼠大腦的丘腦區(qū)，頂葉皮層區(qū)活化型半胱天冬酶-3(cleaved caspase-3)明顯的增多，但在海馬區(qū)卻沒看到明顯差異。且在皮層區(qū)中，我們進而發(fā)現(xiàn)七氟烷能導(dǎo)致細胞活性氧(ROS)的增多。七氟烷還能降低海馬齒狀回區(qū)的BrdU標(biāo)記陽性的神經(jīng)前體細胞。然而，我們發(fā)現(xiàn)圍產(chǎn)期服用魚油能明顯降低新生大鼠皮層區(qū)活化型半胱天冬酶-3(cleaved caspase-3)和細胞活性氧(ROS)，且改善海馬區(qū)齒狀回BrdU標(biāo)記陽性的神

5、經(jīng)前體細胞。在行為學(xué)實驗中，雖然各組新生鼠成年后在莫里斯水迷宮空間學(xué)習(xí)記憶和莫里斯水迷宮強化記憶實驗中的早期長期記憶了測驗中沒有明顯差異，但是我們發(fā)現(xiàn)七氟烷能明顯損傷新生大鼠成年后對場景恐懼的即刻反應(yīng)、莫里斯水迷宮強化記憶實驗中的工作記和短期記憶，并且魚油能明顯改善七氟烷造成的學(xué)習(xí)記憶損傷。
　　我們的實驗發(fā)現(xiàn)了新生鼠吸入七氟烷能造成神經(jīng)細胞氧化，凋亡和降低神經(jīng)新生，最終導(dǎo)致成年時場景恐懼的即刻反應(yīng)、莫里斯水迷宮強化記憶實驗中的工