BMP-2及FGF-2基因多態(tài)性與強(qiáng)直性脊柱炎易感性的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、研究背景:強(qiáng)直性脊柱炎(Ankylosing Spondylitis，AS)是以骶髂關(guān)節(jié)和脊柱附著點炎癥為主要癥狀的一種慢性進(jìn)行性炎性疾病，與HLA-B27呈強(qiáng)關(guān)聯(lián)，屬自身免疫性疾病，可造成脊柱畸形等關(guān)節(jié)病變表現(xiàn)以及心、眼、耳、肺、腎、神經(jīng)等關(guān)節(jié)外病變表現(xiàn)，嚴(yán)重情況下患者可以失去勞動能力。越來越多的研究認(rèn)為AS的發(fā)生受到遺傳因素和環(huán)境因素的影響，是二者共同作用的結(jié)果，其中遺傳因素與AS的關(guān)系最為密切。已有研究發(fā)現(xiàn)基因多態(tài)性與AS易感性之

2、間存在相關(guān)性，但是BMP-2與FGF-2基因多態(tài)性在AS發(fā)病機(jī)理中的作用并未見報道。因此，本研究旨在分析BMP-2與FGF-2基因多態(tài)性與AS易感性之間的關(guān)系。
　　方法:從北京地區(qū)選取124名AS患者和132名健康人，進(jìn)行病例對照研究。病例組和對照組在年齡和性別上相匹配。所有AS病例的診斷都符合1984年修訂的紐約標(biāo)準(zhǔn)。BMP-2和FGF-2基因多態(tài)性分析采用PCR-直接測序的方法。采用相對危險值(Odds ratio，OR)和

3、95％置信區(qū)間(95％CI)來衡量BMP-2、FGF-2基因多態(tài)性與強(qiáng)直性脊柱炎易感性之間的關(guān)系。采用x2方法計算OR和95％CI。對照組中哈迪-溫伯格平衡的計算也是采用x2方法。酶聯(lián)免疫(ELISA)法測定BMP-2與FGF-2蛋白含量。t檢驗來衡量病例組和對照組在BMP-2和FGF-2蛋白表達(dá)水平上的差異。體外實驗測定BMP-2與FGF-2對成骨細(xì)胞增殖的影響。
　　結(jié)果:BMP-2基因Lys25Ser多態(tài)性位點與AS的患病風(fēng)

4、險顯著相關(guān)(OR=2.600，95％CI=1.163-5.812)。堿基A也可增加強(qiáng)直性脊柱炎的患病風(fēng)險(OR=1.689，95％CI=1.151-2.479)。對于FGF-2基因754C/G多態(tài)性位點來說，CG和CC基因型為強(qiáng)直性脊柱炎的易感基因型(OR=2.132，95％CI=1.200-3.787;OR=3.760，95％CI=1.619-8.733)，C等位基因攜帶者更容易患強(qiáng)直性脊柱炎(OR=1.752,95％CI=1.229

5、-2.498)。
　　Lys25Ser多態(tài)性位點的基因型對BMP-2的表達(dá)具有顯著影響。攜帶有AA基因型的患者BMP-2蛋白表達(dá)含量最高，其次為CA基因型，CC基因型對應(yīng)的蛋白表達(dá)含量最低，差異達(dá)到顯著水平(P＜0.05)。而Arg190Ser和Ser87Ser多態(tài)性位點對BMP-2蛋白表達(dá)沒有顯著影響。對于FGF-2的表達(dá)來說，攜帶有CC基因型(754C/G)的患者FGF-2蛋白表達(dá)含量最高(P＜0.05)，CG和GG基因型對應(yīng)

6、的蛋白表達(dá)含量較低。
　　BMP-2處理成骨細(xì)胞，在72h后測定培養(yǎng)液的吸光度。與對照組相比，A1、A2與A3處理組的吸光度并沒有達(dá)到顯著增加(P＞0.05)。但是A5處理組中吸光度顯著增加，高于其余處理組(P＜0.05)。A+B處理組的吸光度明顯高于A5處理組(P＜0.05)。FGF-2處理成骨細(xì)胞后，與對照組相比，B1、B2與B3處理組的吸光度沒有明顯變化(P＞0.05)。B5處理組吸光度值明顯高于B4(P＜0.05)，但是低

7、于A+B處理組(P＜0.05)。以上結(jié)果表明，在FGF-2與BMP-2蛋白的共同處理下，成骨細(xì)胞的增值率明顯高于FGF-2蛋白與BMP-2蛋白的單獨處理。
　　結(jié)論:本研究獲得的結(jié)論可以概括為以下幾點:
　　1.BMP-2基因多態(tài)性與AS易感性之間存在相關(guān)性。
　　2.FGF-2基因多態(tài)性與AS易感性之間存在相關(guān)性。
　　3.BMP-2蛋白的表達(dá)受多態(tài)性位點的影響。
　　4.FGF-2蛋白的表達(dá)受多態(tài)性位點