shRNA下調(diào)abcb1基因逆轉(zhuǎn)卵巢癌細(xì)胞多藥耐藥性的研究.pdf

1、東南大學(xué)碩士學(xué)位論文shRNA下調(diào)abcb1基因逆轉(zhuǎn)卵巢癌細(xì)胞多藥耐藥性的研究姓名：張洪義申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)；病原生物學(xué)指導(dǎo)教師：竇駿20110603東南人學(xué)塒!l學(xué)位論文結(jié)果1RTPCR從A2780細(xì)胞巾成功擴(kuò)增出口6c6J『基因：2瓊脂糖凝膠電泳顯示成功構(gòu)建三個(gè)干擾質(zhì)卡矗pSUPEREGFPlMDRl，shRNAs及陰性對照質(zhì)粒pSUPEREGFPlscrambleshRNA；3成功轉(zhuǎn)染并篩選出單克降細(xì)胞株A2780p

2、lasmid、A2780scramble—shRNA、A2780MDR1shRNAl、A2780MDR1shRNA2、A2780MDR1shRNA3。4q—PCR和westemblot結(jié)果娃示A2780一MDR1shRNA2、A2780MDR1shRNA3中MDR1蛋白的表達(dá)受劍抑制5MTT檢測細(xì)胞的耐藥申牛漫示：轉(zhuǎn)染了干擾質(zhì)粒的單克隆細(xì)胞株A2780MDRlshRNA2對化療敏感性增強(qiáng)。6平板克降形成實(shí)驗(yàn)表明：各細(xì)胞株之問的克降形成能

3、力沒有顯著差異。7A2780MDRlshRNA2克隆細(xì)胞株在裸鼠皮下形成的腫瘤對紫杉醇化療較其他各組更為敏感。結(jié)論：靶向口6c6J的干擾質(zhì)粒psuPEREGFPl一MDRlshRNA2可以下調(diào)MDR—l的表達(dá)。降低A2780細(xì)胞對長春新堿、紫杉醇耐藥性，但不影響腫瘤細(xì)胞的克降形成能力。本研究提示：shRNA下調(diào)以6c6，基因可減低MDRl表達(dá)，部分地逆轉(zhuǎn)A2780細(xì)胞多藥耐藥性，增強(qiáng)卵巢癌患者對化療的敏感性，提高治愈率?！P(guān)鍵字口6c6