bFGF對戊四氮誘導(dǎo)癲癇持續(xù)狀態(tài)大鼠海馬內(nèi)神經(jīng)發(fā)生及海馬谷氨酸和γ-氨基丁酸含量的影響.pdf

1、目的：癲癇發(fā)作后各種內(nèi)源性的神經(jīng)營養(yǎng)因子對腦損傷的修復(fù)作用正越來越受到關(guān)注，其中堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)能夠減少各種神經(jīng)系統(tǒng)損傷引起神經(jīng)元的凋亡和壞死，維持損傷邊緣神經(jīng)元的存活，因而對神經(jīng)系統(tǒng)的正常功能有保護(hù)作用，但是其作用的具體環(huán)節(jié)和機(jī)制尚未被充分研究。本實(shí)驗(yàn)旨在通過戊四氮癲癇持續(xù)狀態(tài)大鼠模型，觀察bFGF對海馬齒狀回顆粒細(xì)胞層神經(jīng)發(fā)生以及海馬組織內(nèi)主要的興奮性氨基酸與抑制性氨基酸一谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)

2、含量動(dòng)態(tài)變化的影響，研究bFGF對癲癇后腦損傷修復(fù)的作用靶點(diǎn)，以探討腦損傷后的自我修復(fù)的部分機(jī)制，并為臨床癲癇的藥物治療開辟新的思路。 方法：選14d和60d兩個(gè)日齡SD大鼠給予腹腔注射戊四氮(PTZ)，制作癲癇持續(xù)狀態(tài)(SE)發(fā)作模型，再將兩個(gè)日齡組隨機(jī)分為PTZ組(癲癇組)、PTZ+bFGF組(bFGF干預(yù)癲癇組)、NS組(生理鹽水對照組)、Ns+bFGF組(bFGF干預(yù)生理鹽水組)四個(gè)亞組，選擇處理后第7d、14d兩個(gè)時(shí)間

3、點(diǎn)進(jìn)行觀察，每個(gè)亞組每個(gè)時(shí)間點(diǎn)觀察動(dòng)物6只。采用BrdU標(biāo)記新生細(xì)胞檢測SE后大鼠海馬齒狀回神經(jīng)發(fā)生，應(yīng)用高效液相方法檢測海馬組織谷氨酸和γ-氨基丁酸含量。 結(jié)果： 1、BrdU免疫反應(yīng)產(chǎn)物：處理后第7d和14d，PTZ組中各日齡組大鼠海馬齒狀回BrdU陽性細(xì)胞數(shù)明顯高于同日齡的NS組(P<0.01)；PTZ+bFGF組BrdU免疫陽性細(xì)胞數(shù)較同日齡PTZ組也有升高(在14天日齡組P<0.05，在60天日齡組P<0.01

4、)；NS+bFGF組各日齡大鼠Brdu陽性細(xì)胞數(shù)亦高于同日齡的NS組(P<0.05)；從BrdU陽性細(xì)胞分布位置來看，不管是14日齡組還是60日齡組，BrdU陽性細(xì)胞在NS組、NS+bFGF組主要分布于顆粒細(xì)胞層；在PTZ組、PTZ+bFGF兩組，發(fā)作后7天，大部分BrdU免疫陽性細(xì)胞分布于齒狀回顆粒細(xì)胞下層，處理后第14天， BrdU陽性細(xì)胞除了分布于顆粒細(xì)胞層以外，另有一部分位于門區(qū)和內(nèi)分子層。新生細(xì)胞在由顆粒下層向顆粒層遷移的過程

5、中，胞核變大，形狀更接近圓形或卵圓形。陰性對照實(shí)驗(yàn)切片無特征性免疫反應(yīng)產(chǎn)物。 2、癲癇后海馬谷氨酸、γ-氨基丁酸含量變化：PTZ組發(fā)作后7天、14天兩日齡組海馬組織谷氨酸的含量較NS組有顯著增高(P<0.01)，以發(fā)作后14天升高更為明顯，PTZ+bFGF組各時(shí)間點(diǎn)谷氨酸含量較PTZ組下降(P<0.05)；γ-氨基丁酸含量在PTZ組各時(shí)間點(diǎn)濃度亦大于NS組(P<0.05)，以發(fā)作后14天升高較為顯著；兩個(gè)日齡大鼠PTZ+bFGF