AT9810的提取及裸小鼠體、內(nèi)外抗GBC-SD作用的試驗(yàn)研究.pdf

1、山東大學(xué)博士學(xué)位論文AT9810的提取及裸小鼠體、內(nèi)外抗GBCSD作用的試驗(yàn)研究姓名：薛宏偉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)（血液病）指導(dǎo)教師：潘祥林20030316山東人學(xué)博士學(xué)位論文第一部分AT9810的提取、分離及抗6BO—SD的作用博士研究生薛宏偉博士生導(dǎo)師潘祥麟教授摘要目的：延命草的主要抗癌有效成分為二萜類化合物，其對(duì)多種癌細(xì)胞和移植腫瘤有明顯的抑制作用，但未見(jiàn)其作用于膽囊癌的相關(guān)報(bào)道。由于延命草種類繁多，所含的二萜類物質(zhì)在結(jié)構(gòu)

2、、含量和活性等方面差異較大，藥理學(xué)活性也不同，因此我們對(duì)其中的某一種藥材進(jìn)行了二萜類成分的提取和分離，以期挖掘延命草的抗膽囊癌活性成分，篩選出更有效的抗人膽囊癌細(xì)胞GBC—SD成分。方法：采用95％的乙醇回流浸提法，提取延命草中的大部分可溶性化合物。經(jīng)活性炭脫色過(guò)濾和石油醚萃取后，將提取的物質(zhì)混裝成硅膠柱(柱層洗法)，以氯仿和甲醇的混合液梯度洗脫，每400ml為一個(gè)流動(dòng)份額，用薄層分析(TCL)跟蹤測(cè)試，相同的流動(dòng)份額合并入一瓶中，在冷

3、藏箱中待結(jié)晶析出。重結(jié)晶所得化合物，經(jīng)減壓過(guò)濾后，干燥，收藏備用。配制濃度為4ug／m1的上述結(jié)晶物質(zhì)，使其作用于體外培養(yǎng)的GBC—SD細(xì)胞24h，觀察其生長(zhǎng)狀態(tài)，并用MTT法檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率(或存活率)。TCL測(cè)Rf值，HPLC測(cè)純度。結(jié)果：4Kg延命草經(jīng)95％的乙醇回流提取3h，共三次后，得浸膏約300ml。經(jīng)活性炭脫色過(guò)濾和石油醚萃取濃縮后，得浸膏200ral。經(jīng)氯仿一甲醇梯度洗脫含浸膏的硅膠柱，提取出的6種含量較大的物質(zhì)，分別

4、命名為AT9810a、AT9810b、hT9810c、AT9810d、AT9810e、AT9810f。其中AT9810a、hT9810b對(duì)GBCSD細(xì)胞有明顯抑制作用，其Rf值分別為060、040左右，經(jīng)重結(jié)晶后稱重分別為135mg、25rag，，純度分別是978％，992％。結(jié)論：(1)仿仿一甲醇較石油醚一丙酮洗脫萜類物質(zhì)效果好。(2)從延命草中提取出的二種明顯抑制GBC—SD細(xì)胞生長(zhǎng)化合物。(3)提取過(guò)程簡(jiǎn)單試劑價(jià)廉、易得，適合于實(shí)