Fas配體胞外區(qū)的克隆、表達及Fas反義肽的篩選和活性研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、Fas(APO-1,CD95)屬于腫瘤壞死因子超家族之一員,是Fas配體(FasL)的受體.當它的配體FasL與之結合后,可以引起表達Fas的細胞發(fā)生凋亡.該研究依據(jù)AHBs理論,應用自行編寫的軟件,在FasL分子中尋找到與Fas相應的反義多肽最為接近的十肽結構即FasL<,256-265>(匹配度為70﹪).化學合成了十肽結構,與重組FasL-ECD(FasL胞外區(qū))平行對照,研究了其對培養(yǎng)的腫瘤細胞的相互作用.該研究為依據(jù)ABHs理

2、論,篩選與開發(fā)具有誘導細胞凋亡的抗腫瘤多肽類藥物具有一定的指導意義.(1)分析人黑色素瘤細胞(A375)中FasL基因的表達,克隆人FasL胞外區(qū)的編碼基因,并在大腸桿菌BL21中進行表達.純化重組蛋白FasL-ECD,并分析其生物學活性,篩選出對之最敏感的腫瘤細胞株;(2)根據(jù)生物信息學軟件分析結果,選取FasL胞外區(qū)256-265的十肽(N)-HLYVNVSELS-(C)作為目標分子,委托生物公司合成該十肽;(3)分析FasL-EC

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