失血性休克大鼠腸上皮細(xì)胞線粒體DNA COX基因、表達(dá)和功能改變及Rg1干預(yù)的研究.pdf

1、一、研究失血性休克大鼠缺血氧后腸上皮細(xì)胞線粒體DNA COXⅠ、COXⅡ、COXⅢ基因損傷(突變)及其表達(dá)改變和突變后對其編碼的COX酶蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的改變及其對酶功能的影響,從基因、轉(zhuǎn)錄、翻譯水平探討缺血缺氧后COX在線粒體有氧呼吸功能改變中的作用,闡明其結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系,揭示細(xì)胞缺血缺氧性損害中能量代謝障礙的分子機制.二、研究三七皂甙單體Rg1對失血性休克大鼠缺血氧后腸上皮細(xì)胞線粒體損傷的保護作用及其對COX活性和相關(guān)基因表達(dá)的影響

2、,從線粒體的形態(tài)、功能、基因表達(dá)及失血性林克大鼠存活率等多方面探討Rg1對缺血缺氧性線粒體損傷的保護作用及其機理.失血性休克晚期可導(dǎo)致大鼠腸上皮細(xì)胞mtDNA編碼的COXⅠ、COXⅡ亞基基因突變,同時伴有該酶活性的明顯下降,采用生物信息學(xué)技術(shù),通過計算機模建的大鼠腸上皮細(xì)胞mtDNA突變后COX的三維結(jié)構(gòu)分析表明COX基因的突變導(dǎo)致了整個酶復(fù)合物的三維空間結(jié)構(gòu)改變.提示:突變后酶復(fù)合物的結(jié)構(gòu)改變是酶活性降低的重要原因.RT-PCR和We

3、stern blot檢測結(jié)果顯示,失血性休克晚期可導(dǎo)致大鼠腸上皮細(xì)胞編碼COXⅠ、COXⅡ基因表達(dá)下降,線粒體蛋白表達(dá)量減少,呼吸功能降低.提示:線粒體功能障礙與線粒體編碼COXⅠ、COXⅡ基因之間存在聯(lián)系.失血性休克晚期可導(dǎo)致大鼠腸上皮細(xì)胞線粒體出現(xiàn)一定程度膜損傷、體積增大等形態(tài)變化,這種變化可能與失血性休克時mtDNA損傷、轉(zhuǎn)錄、翻譯功能的改變、呼吸功能下降及酶的結(jié)構(gòu)和活性改變有關(guān),提示:mtDNA編碼COX基因損傷及其表達(dá)的改變可