青藏高原野生大麥HsCBL8基因在水稻中的表達(dá)及其耐鹽性分析.pdf

1、水稻是我國(guó)最重要的糧食作物之一，然而土壤鹽堿化嚴(yán)重影響水稻產(chǎn)量。運(yùn)用現(xiàn)代育種技術(shù)培育耐鹽水稻新品種是應(yīng)對(duì)土壤鹽堿化問題的重要手段，而野生種質(zhì)資源開發(fā)對(duì)于現(xiàn)代育種具有重大的意義。青藏高原被證明是栽培大麥起源中心之一，具有豐富的野生大麥種質(zhì)資源，能為農(nóng)作物逆境脅迫抗性育種提供寶貴的基因資源。CBL家族蛋白是植物所特有的Ca2+感受蛋白，能與CIPK蛋白形成復(fù)合體，特異性解碼Ca2+信號(hào)，調(diào)控植物體響應(yīng)逆境脅迫。本研究將野生大麥中耐鹽相關(guān)基因

2、HsCBL8導(dǎo)入到擬南芥和水稻中，以研究其在植物耐鹽生理中的作用。取得的主要成果如下:
　　1.比較了青藏高原一年生野生大麥XZ166(HsCBL8的來源)與栽培大麥CM72在鹽脅迫下的植株表型差異，Na+、K+含量及其比率，發(fā)現(xiàn)XZ166具有高度耐鹽性;熒光定量PCR證明XZ166中CBL8基因?qū)}脅迫響應(yīng)更加高效。
　　2.構(gòu)建ProHsCBL8-GUS表達(dá)載體，導(dǎo)入擬南芥中，在外源ABA、鹽脅迫、干旱脅迫和冷脅迫處理?xiàng)l

3、件下，轉(zhuǎn)基因擬南芥GUS蛋白活性不同程度升高，表明HsCBL8受多種逆境誘導(dǎo)上調(diào)表達(dá)。
　　3.構(gòu)建35S-HsCBL8超表達(dá)載體，通過農(nóng)桿菌導(dǎo)入水稻品種ZH11，經(jīng)過PCR、Southern雜交及反轉(zhuǎn)錄PCR驗(yàn)證，獲得了目的基因單拷貝插入并且能穩(wěn)定表達(dá)的純合轉(zhuǎn)基因后代。
　　4.比較T3代轉(zhuǎn)基因水稻與野生型水稻在鹽脅迫(100mM NaCl)下植株表型和各項(xiàng)耐鹽生理數(shù)據(jù)，結(jié)果顯示轉(zhuǎn)基因水稻耐鹽性顯著高于野生型，證明外源Hs