REM睡眠剝奪對大鼠腦內(nèi)不同部位基因表達(dá)影響的初步分析.pdf

1、睡眠是一個(gè)復(fù)雜的生理過程，正常人每天均有一個(gè)自然的睡眠覺醒周期，這是中樞神經(jīng)系統(tǒng)主動(dòng)產(chǎn)生的神經(jīng)調(diào)節(jié)過程。睡眠對于機(jī)體的生長發(fā)育、學(xué)習(xí)記憶等方面均具有重要的意義。隨著生活節(jié)奏的加快，睡眠剝奪現(xiàn)象普遍存在，并且對正常生活產(chǎn)生了巨大的影響。
　　本研究建立大鼠睡眠剝奪24、48、72h模型，運(yùn)用RT-PCR和免疫組化方法檢測不同時(shí)間點(diǎn)大鼠腦內(nèi)海馬、皮質(zhì)、小腦三個(gè)部位c-fos、nestin、bid3和jak2基因mRNA水平和蛋白水平的

2、變化。為進(jìn)一步研究睡眠剝奪所造成生理影響的分子機(jī)制提供線索。
　　第一部分：RT-PCR檢測c-fos、nestin、bid3和jak2基因mRNA水平變化
　　方法：采用小平臺(tái)水環(huán)境法建立大鼠REM睡眠剝奪24、48、72h模型，設(shè)立大平臺(tái)對照組和正常飼養(yǎng)對照組，RT-PCR方法分別檢測各組大鼠海馬、皮質(zhì)和小腦中c-fos、nestin、bid3和jak2的表達(dá)水平。結(jié)果：與空白對照組（C）比較，可見c-fos、bid3和

3、jak2表達(dá)水平隨SD時(shí)間延長而增加，且與大平臺(tái)對照組（LP）存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。而SD各組可見nestin表達(dá)水平降低，但與LP組比較，僅海馬可見明顯差異，皮質(zhì)與小腦均無明顯差別。
　　第二部分：免疫組化檢測Fos、Nestin、Bid3和Jak2蛋白水平變化
　　方法：采用小平臺(tái)水環(huán)境法建立大鼠REM睡眠剝奪24、48、72h模型，設(shè)立正常飼養(yǎng)對照組，免疫組化SP法分別檢測各組大鼠海馬、皮質(zhì)和小腦中Fos、Nestin、Bi

4、d3和Jak2蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果：與空白對照組（C）比較，SD組在海馬、皮質(zhì)、小腦三個(gè)部位Fos、Bid3和Jak2蛋白表達(dá)水平均有提高，而在這三個(gè)部位均未見明顯Nestin陽性細(xì)胞。
　　本研究結(jié)果顯示：睡眠剝奪對大鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)c-fos、nestin、bid3和jak2基因的mRNA和蛋白水平表達(dá)均有影響?？傮w而言，SD可以上調(diào)c-fos、bid3和jak2基因mRNA水平，且蛋白水平也有提高。同時(shí)，SD可以下調(diào)nesti