多沙唑嗪光學(xué)異構(gòu)體降低動物膀胱排尿壓的作用機(jī)制研究.pdf

1、良性前列腺增生(BPH)是老年男性常見病,常導(dǎo)致下尿路癥狀(LUTS),嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。長效α1受體阻斷藥消旋多沙唑嗪(rac-DOX)可阻斷下尿路α1受體,降低患者排尿阻力,緩解BPH/LUTS癥狀,是臨床治療BPH/LUTS的常用藥物。但是,rac-DOX常引起頭暈、頭痛和低血壓等不良反應(yīng)。因此,應(yīng)用α1受體阻斷藥治療BPH/LUTS時,應(yīng)考慮藥物的"尿路選擇性"。rac-DOX由光學(xué)異構(gòu)體S-多沙唑嗪(S-doxazosi

2、n,S-DOX)和R-多沙唑嗪(R-doxazosin,R-DOX)組成。藥理學(xué)研究結(jié)果表明,rac-DOX、S-DOX和R-DOX阻斷人前列腺組織中α1受體的pA2值相同.本室研究發(fā)現(xiàn),S-DOX降低動物血壓和阻斷血管α1受體的作用明顯弱于rac-DOX和.R-DOX,但S-DOX降低膀胱排尿壓的作用與rac-DOX相同。為了分析藥物降低動物膀胱排尿壓的作用機(jī)制,我們采用兔離體膀胱、前列腺及尿道組織,觀察了多沙唑嗪及其光學(xué)異構(gòu)體的作用

3、,同時利用老年小鼠觀察多沙唑嗪及其光學(xué)異構(gòu)體對前列腺細(xì)胞增殖與凋亡的影響。 第一部分多沙唑嗪光學(xué)異構(gòu)體對兔離體膀胱逼尿肌的作用和作用機(jī)制 本研究觀察了SoDOX、R-DOX和rac-DOX對兔離體膀胱逼尿肌收縮反應(yīng)的影響。利用兔離體背側(cè)和腹側(cè)膀胱逼尿肌標(biāo)本,分析多沙唑嗪及其光學(xué)異構(gòu)體對藥物或神經(jīng)刺激誘發(fā)兔離體膀胱逼尿肌收縮反應(yīng)的影響并分析其作用機(jī)制。 1.背側(cè)、腹側(cè)膀胱逼尿肌對卡巴膽堿和苯腎上腺素誘發(fā)收縮反應(yīng)的比

4、較 卡巴膽堿(0.01～30μmol·L-1)使背側(cè)和腹側(cè)膀胱逼尿肌產(chǎn)生濃度依賴性收縮反應(yīng),卡巴膽堿的濃度-反應(yīng)曲線在兩種標(biāo)本上無顯著性差異(P>0.05)；與卡巴膽堿不同,苯腎上腺素(0.1～300μmol·L-1)僅使背側(cè)膀胱逼尿肌產(chǎn)生濃度依賴性收縮反應(yīng),對腹側(cè)膀胱逼尿肌無收縮作用。 2.S-DOX、R-DOX及rac-DOX對苯腎上腺素誘發(fā)兔背側(cè)膀胱逼尿肌收縮反應(yīng)的影響 苯腎上腺素使背側(cè)膀胱逼尿肌產(chǎn)生濃度依

5、賴性收縮反應(yīng),溶劑對苯腎上腺素誘發(fā)的兔背側(cè)膀胱逼尿肌收縮反應(yīng)無影響(P>0.05).S-DOX、R-DOX和rac-DOX拮抗苯腎上腺素誘發(fā)兔背側(cè)膀胱逼尿肌收縮反應(yīng)的pKB值分別為7.44±0.19、7.39±0.14和7.38±0.30,三者之間無顯著性差異(P>0.05)。 3.S-DOX、R-DOX及rac-DOX對電場刺激誘發(fā)兔背側(cè)、腹側(cè)膀胱逼尿肌收縮反應(yīng)的影響 電場刺激誘發(fā)兔背側(cè)和腹側(cè)膀胱逼尿肌產(chǎn)生穩(wěn)定的收縮反

6、應(yīng),該收縮反應(yīng)被0.1lxmol·L-1的河豚毒素(TTX)完全阻斷.S-DOX、R-DOX和rac-DOX均顯著抑制電場刺激誘發(fā)的背側(cè)膀胱逼尿肌收縮反應(yīng)(P<0.01),且三者的抑制作用強(qiáng)度無顯著性差異(P>0.05)；但是,它們對電場刺激誘發(fā)的兔腹側(cè)膀胱逼尿肌收縮反應(yīng)無影響(P>0.05)。 上述結(jié)果表明,S-DOX、R-DOX和rac-DOX通過阻斷膀胱逼尿肌α1受體顯著抑制電場刺激誘發(fā)的兔背側(cè)膀胱逼尿肌收縮反應(yīng),三者的抑

7、制作用強(qiáng)度無顯著性差異。 第二部分多沙唑嗪光學(xué)異構(gòu)體對兔離體前列腺平滑肌收縮反應(yīng)的影響 本研究觀察了S-DOX、R-DOX和rac-DOX對兔離體前列腺收縮反應(yīng)的影響.利用兔離體前列腺標(biāo)本,分析多沙唑嗪及其光學(xué)異構(gòu)體對藥物或神經(jīng)刺激誘發(fā)兔離體前列腺收縮反應(yīng)的影響并分析其作用機(jī)制。 1.S-DOX、R-DOX及rac-DOX對苯腎上腺素誘發(fā)兔離體前列腺收縮反應(yīng)的影響 苯腎上腺素使前列腺產(chǎn)生濃度依賴性收縮反應(yīng)

8、,溶劑對苯腎上腺素誘發(fā)的兔離體前列腺收縮反應(yīng)無影響(P>0.05).0.01gmol·L-1和0.03μmol·L-1的S-DOX、R-DOX或rac-DOX均可使苯腎上腺素量效曲線平行右移,Emax值不變.Schild plot分析結(jié)果表明,S-DOX、R-DOX或rac-DOX競爭性拮抗苯腎上腺素誘發(fā)的兔離體前列腺收縮反應(yīng),其pA2值分別為8.22±0.03、8.25±0.03和8.20±0.04,三者間無顯著性差異(P>0.05)

9、.S-DOX、R-DOX和rac-DOX拮抗苯腎上腺素誘發(fā)兔前列腺收縮反應(yīng)的作用強(qiáng)度相同。 2.S-DOX、R-DOX及rac-DOX對電場刺激誘發(fā)兔離體前列腺收縮反應(yīng)的影響 電場刺激誘發(fā)兔離體前列腺產(chǎn)生穩(wěn)定的收縮反應(yīng),該收縮反應(yīng)被0.1μmol·L-1的TTX完全阻斷.0.01μmol·L-1或0.1μmol·L-1的S-DOX、R-DOX和rac-DOX顯著抑制電場刺激誘發(fā)的兔前列腺收縮反應(yīng)(P＜0.01),三者對電

10、場刺激誘發(fā)兔離體前列腺收縮反應(yīng)的抑制強(qiáng)度無顯著性差異(P＞0.05)。 3.Atr、Phent以及PPADS對電場刺激誘發(fā)兔離體前列腺收縮反應(yīng)的影響 1μmol.L-1Atr單獨(dú)應(yīng)用顯著抑制電場刺激誘發(fā)的前列腺收縮反應(yīng),抑制百分率為62.64±11.7％(P＜0.01),聯(lián)合應(yīng)用10pmol·L-1的Phent后,二者完全抑制電場刺激誘發(fā)的前列腺收縮反應(yīng).單獨(dú)給予10μmol·L-1Phent可顯著抑制電場刺激誘發(fā)的前列

11、腺收縮反應(yīng),抑制百分率為96.7±9.3％(P＜0.01),繼續(xù)給予1μmol.L-1Atr后,二者完全抑制電場刺激誘發(fā)的前列腺收縮反應(yīng).10μmol.L-1PPADS對電場刺激誘發(fā)的前列腺收縮反應(yīng)無明顯影響(P>0.05).TTX(0.1μmol.L-1)完全阻斷該條件下電場刺激誘發(fā)的收縮反應(yīng)。 上述結(jié)果表明,多沙唑嗪及其光學(xué)異構(gòu)體顯著抑制電場刺激誘發(fā)的兔離體前列腺收縮反應(yīng),其作用機(jī)制與藥物阻斷突出后α1受體有關(guān),三者對兔離體

12、前列腺α1受體的親和力相同。 第三部分多沙唑嗪光學(xué)異構(gòu)體對兔離體尿道環(huán)肌收縮功能的影響 制備兔離體膀胱頸和尿道環(huán)肌標(biāo)本,記錄藥物或神經(jīng)刺激誘發(fā)的收縮反應(yīng).觀察多沙唑嗪及其光學(xué)異構(gòu)體對苯腎上腺素誘發(fā)兔離體膀胱頸和尿道環(huán)肌收縮反應(yīng)的影響；分析藥物對電場刺激誘發(fā)兔離體尿道環(huán)肌收縮反應(yīng)的作用及其作用機(jī)制。 1.S-DOX、R-DOX及rac-DOX對苯腎上腺素誘發(fā)兔膀胱頸和尿道環(huán)肌收縮反應(yīng)的影響 2.rat-DO

13、X對電場刺激誘發(fā)兔膀胱頸和尿道環(huán)肌收縮反應(yīng)的影響 3.Pra、Atr及Ind對電場刺激誘發(fā)兔膀胱頸和尿道環(huán)肌收縮反應(yīng)的影響 4.Atr、Phent、Tub、尼古丁、蘇拉明及TTX對電場刺激誘發(fā)兔尿道環(huán)肌收縮反應(yīng)的影響 5.CCh、Mox、Clo、Ado、ATP、UTP、5-HT和His對兔尿道環(huán)肌的作用 上述結(jié)果表明,S-DOX、R-DOX和rac-DOX通過阻斷α1受體拮抗苯腎上腺素誘發(fā)的兔膀胱頸和尿道

14、環(huán)肌收縮反應(yīng),三者阻斷α1受體的作用相同。電場刺激誘發(fā)的兔尿道環(huán)肌收縮反應(yīng)具有骨骼肌運(yùn)動神經(jīng)興奮的特性,這一收縮成分同時易被尼古丁或蘇拉明阻斷。 第四部分多沙唑嗪光學(xué)異構(gòu)體對老年小鼠前列腺增生的影響 實(shí)驗(yàn)采用老年小鼠長期(12周)灌胃給藥法,觀察了S-DOX、R-DOX和rac-DOX對老年小鼠前列腺體積、濕重、細(xì)胞增殖周期與凋亡百分率的影響。 1.S-DOX、R-DOX和rac-DOX對前列腺體積和濕重的影響與

15、青年對照組相比,老年組小鼠前列腺體積指數(shù)無顯著性差異,而S-DOX 6.0mg·kg-1組、R-DOX 6.0mg·kg-1組和R-DOX 0.6mg·kg-1組以及rac-DOX 6.0mg·kg-1組小鼠前列腺體指數(shù)顯著減小(P<0.05)。 2.S-DOX、R-DOX和rac-DOX對小鼠前葉前列腺細(xì)胞增殖周期及凋亡的影響與青年對照組相比,老年組小鼠前葉前列腺G0/G1期細(xì)胞周期百分率顯著降低(P<0.01), G2/M期

16、細(xì)胞周期百分率和增殖指數(shù)均顯著增高(P<0.01)；老年組小鼠前列腺細(xì)胞細(xì)胞凋亡率無明顯改變。與老年組相比,S-DOX、R-DOX和rac-DOX老年小鼠前列腺細(xì)胞的增值指數(shù)和細(xì)胞周期無顯著影響。 上述結(jié)果表明,長期(12周)灌胃給予S-DOX、R-DOX和rac-DOX,可能輕度降低老年小鼠前列腺細(xì)胞體積指數(shù)。 S-DOX對心血管系統(tǒng)的抑制作用明顯弱于R-DOX和rac-DOX,但是其降低膀胱排尿壓的作用與同劑量rac

17、-DOX相同.本研究證明,S-DOX降低動物膀胱排尿壓的作用與其抑制去甲腎上腺素能神經(jīng)興奮所致的膀胱逼尿肌和前列腺平滑肌收縮反應(yīng)有關(guān)；其作用機(jī)制是阻斷了上述平滑肌組織的α1受體.S-DOX的上述作用及作用強(qiáng)度與R-DOX相同,說明兔膀胱逼尿肌和前列腺平滑肌細(xì)胞膜上的0c.受體對多沙唑嗪光學(xué)異構(gòu)體的親和力相同。 S-DOX、R-DOX及rac-DOX可阻斷兔尿道環(huán)肌α1受體,三者的作用強(qiáng)度相同；但是α1受體阻斷藥rac-DOX及哌