植物病原真菌拮抗菌TG116的鑒定、生物學特性及生防機理研究.pdf

1、植物真菌病害導致的農作物減產和采后損失一直以來都是阻礙農業(yè)生產的關鍵問題之一，生物防治植物真菌病害因為在應用中具有對環(huán)境安全、無污染、特異性強、不產生抗藥性等優(yōu)點而受到越來越多的關注。內生菌可以被用來防治植物真菌病害，并且部分菌株已經被研發(fā)成生物農藥用于農業(yè)生產當中。獨角蓮具有廣泛的藥理作用和豐富的化學成分，并且在生長過程中不易感染病蟲害，聯(lián)系植物內生菌的廣泛生物學功能推測，與獨角蓮長期協(xié)同進化的內生菌也可能具有一定的獨特性和研究價值，

2、已有研究也表明藥用植物中含有豐富的生物防治資源菌，但關于獨角蓮內生菌的研究還未見報道。
　　為了給生物防治植物真菌病害提供新的菌種資源，本研究對獨角蓮中的內生菌進行了分離，并篩選得到了一株廣譜植物病原真菌拮抗菌 TG116，測定了菌株 TG116對植物病原真菌的抑菌譜和抑菌特性，通過盆栽防病試驗對其生防潛能進行了進一步的驗證和探索，利用形態(tài)學、生理生化及分子生物學方法對其進行了鑒定，并對其生物學特性和有關生物防治植物病害的機理進行

3、了研究，結果如下：
　?。?）菌株 TG116能夠拮抗供試的7種不同植物病原真菌，抗菌譜較廣，并且可以使植物病原真菌菌絲原生質外滲，菌絲中空、形態(tài)扭曲、變形等，菌株 TG116浸種和灌根的處理在盆栽防病試驗中也有較好防治效果，隨著 TG116菌液處理后接種植物病原真菌間隔時間的延長，防病效果也有所提高，TG116胞外代謝產物和菌體都有一定的防病效果。
　?。?）菌株TG116的形態(tài)學及生理生化特征和地衣芽孢桿菌相吻合，16S

4、 rRNA序列的分析比對結果顯示其與地衣芽孢桿菌的同源性高達99％，因而將菌株TG116鑒定為地衣芽孢桿菌（Bacillus licheniformis）。
　　（3）菌株TG116培養(yǎng)8－16 h生長處于對數期，16 h后進入穩(wěn)定期，48 h后進入衰退期；最適接種量為1%；在20－60℃的溫度范圍內都能夠生長，45℃為最適生長溫度；在pH3.0－9.0的范圍內都能夠生長，最適生長pH為7.0；在1%的NaCl滲透壓條件下生長最好

5、；對供試碳源、氮源利用率最高的分別為纖維二糖和酵母粉；菌株TG116對環(huán)境的適應能力較強。
　　（4）在一定時間段內經菌株TG116誘導的處理黃瓜葉片中PAL、POD、PPO活性都顯著高于未經其誘導的處理，與植物病原真菌共同接種時以上酶活性升高的幅度比單獨接種菌株TG116的大，說明同時接種病原菌有利于菌株TG116誘導抗性的表達；單獨接種菌株TG116后，黃瓜葉片中SOD活性也有所上升，但上升幅度并不明顯，MDA含量變化不大且略