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1、本實(shí)驗(yàn)通過(guò)光學(xué)顯微鏡和超微結(jié)構(gòu)觀察了糙海參(Holothuriascabra)精子發(fā)生的過(guò)程及其形態(tài)結(jié)構(gòu);在掃描與透射電鏡下觀察了卵子發(fā)生及卵黃發(fā)生的過(guò)程。應(yīng)用組織學(xué)方法,對(duì)我國(guó)海南糙海參種群的性腺發(fā)育過(guò)程進(jìn)行了周年觀察,研究其性腺發(fā)育特征及繁殖特性。研究結(jié)果揭示了我國(guó)海南糙海參配子發(fā)生、性腺發(fā)育和產(chǎn)卵繁殖的基本特點(diǎn),對(duì)于今后開(kāi)展該物種野生種群的資源保護(hù)及人工育苗生產(chǎn)具有實(shí)際的指導(dǎo)作用。主要內(nèi)容包括以下三部分:
1、糙海參精子
2、的發(fā)生及超微形態(tài)結(jié)構(gòu)
糙海參精子發(fā)生經(jīng)歷了精原細(xì)胞、初級(jí)精母細(xì)胞、次級(jí)精母細(xì)胞、精細(xì)胞和成熟精子五個(gè)階段。精細(xì)胞分化過(guò)程可分為3個(gè)時(shí)期,早期:細(xì)胞核前端出現(xiàn)前頂體囊;中期:頂體腔內(nèi)出現(xiàn)圍頂體物質(zhì);后期:胞質(zhì)往尾部方向收縮,形成精子中部。糙海參精子全長(zhǎng)約60μm,由頭部、中部和尾部三部分組成,為典型的鞭毛型精子。精子頭部呈球形,橫軸長(zhǎng)約1.8μm,縱軸長(zhǎng)約1.4μm,頂體呈“U”型內(nèi)陷在精子核中,而圍項(xiàng)體物質(zhì)呈“月牙”形,核染色
3、質(zhì)凝集成團(tuán)塊狀。中部由一個(gè)巨大的線粒體和中心粒復(fù)合體融合而成。精子尾部細(xì)長(zhǎng),鞭毛橫切面為典型的“9+2”微管結(jié)構(gòu)。
2、糙海參卵子發(fā)生及卵黃發(fā)生的超微結(jié)構(gòu)
糙海參卵子屬于均黃卵,其卵子發(fā)生經(jīng)歷卵原細(xì)胞、卵黃發(fā)生前卵母細(xì)胞、卵黃發(fā)生期卵母細(xì)胞3個(gè)階段。其中,卵黃發(fā)生期卵母細(xì)胞分別包括卵黃發(fā)生早期、中期、后期卵母細(xì)胞三個(gè)階段。卵原細(xì)胞核大且呈橢圓形,胞質(zhì)中只分布少量的線粒體;卵黃發(fā)生前卵母細(xì)胞內(nèi)有一個(gè)空泡狀的生發(fā)泡(卵核
4、);卵黃發(fā)生早期,細(xì)胞器種類豐富,數(shù)量多;卵黃發(fā)生中期,卵黃合成旺盛,是內(nèi)源性卵黃大量形成的階段,多種細(xì)胞器活躍參與形成卵黃;卵黃發(fā)生后期,細(xì)胞體積最大,細(xì)胞核明顯,且位于胞質(zhì)中間或者靠近動(dòng)物極突。高爾基體、線粒體及核糖體是形成內(nèi)源性卵黃最主要的細(xì)胞器。卵質(zhì)膜通過(guò)胞飲作用參與外源性卵黃的形成。
3、海南糙海參的性腺發(fā)育及繁殖特性
海南糙海參的性腺發(fā)育可分為恢復(fù)期(Ⅰ期)、增長(zhǎng)期(Ⅱ期)、成熟期(Ⅲ期)、部分排放期(Ⅳ
5、期)、排空期(Ⅴ期)共5個(gè)時(shí)期。(1)精巢發(fā)育特征:Ⅰ期,生殖管壁最厚;Ⅱ期,生殖管上皮變薄且褶皺,往管腔中延伸;Ⅲ期,精子密度最大,充滿整個(gè)生殖管;Ⅳ期,生殖上皮恢復(fù)到原來(lái)褶皺形態(tài);Ⅴ期,生殖管中剩余少量殘留精子。(2)卵巢發(fā)育特征:Ⅰ期,在生殖上皮附近附著卵原細(xì)胞和卵黃發(fā)生前期卵母細(xì)胞;Ⅱ期,生殖管腔中央含有大量卵黃發(fā)生時(shí)期卵母細(xì)胞,其周圍為卵原細(xì)胞及卵黃發(fā)生前期卵母細(xì)胞;Ⅲ期,生殖管腔中充滿卵黃發(fā)生時(shí)期卵母細(xì)胞;Ⅳ期,在生殖上皮附
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