活動(dòng)性肺結(jié)核病相關(guān)細(xì)胞因子及其DNA甲基化研究.pdf

1、肺結(jié)核病（pulmonary tuberculosis，PTB）是由結(jié)核分枝桿菌（Mycobacteriumtuberculosis，M.tb）引起的一種與機(jī)體細(xì)胞免疫應(yīng)答密切相關(guān)的慢性感染性疾病?；罨腡淋巴細(xì)胞及其分泌的細(xì)胞因子在感染和疾病的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用。
　　為進(jìn)一步了解活動(dòng)性肺結(jié)核病相關(guān)細(xì)胞因子的變化，本課題檢測(cè)了肺結(jié)核病人和結(jié)核分枝桿菌潛伏感染者血漿中細(xì)胞因子表達(dá)水平的差異，并且隨訪觀察了肺結(jié)核病人密切接觸者

2、外周血細(xì)胞因子譜的動(dòng)態(tài)變化。結(jié)果顯示:肺結(jié)核病人血漿中CXCL12、CCL1及TNF-α等一組細(xì)胞因子相對(duì)于健康對(duì)照和潛伏感染者都有顯著的升高;隨訪隊(duì)列中發(fā)病的患者外周血中CXCL12和抗原特異性IFN-γ表達(dá)水平隨疾病的發(fā)生而顯著升高。
　　隨之，我們進(jìn)一步了解細(xì)胞因子顯著性差異表達(dá)是否與基因組DNA甲基化水平有密切關(guān)系。利用全基因組DNA甲基化芯片的方法，我們比較了健康對(duì)照和活動(dòng)性肺結(jié)核病人基因組甲基化狀態(tài)。芯片結(jié)果顯示:活動(dòng)

3、性肺結(jié)核病人較健康對(duì)照呈現(xiàn)顯著性低甲基化狀態(tài)，在1，370個(gè)差異性基因中有90.4％的基因（1，234個(gè)）甲基化程度降低。GO分析顯示甲基化程度存在差異的基因參與了炎癥反應(yīng)、B細(xì)胞分化等多種免疫相關(guān)功能。此結(jié)果表明宿主基因的低甲基化狀態(tài)可能是活動(dòng)性肺結(jié)核病人的特征之一。前期實(shí)驗(yàn)表明CXCL12的表達(dá)水平與肺結(jié)核病密切相關(guān)。因此，我們同時(shí)利用硫化測(cè)序法檢測(cè)了健康對(duì)照和病人cxcl12基因啟動(dòng)子區(qū)域的甲基化率。結(jié)果表明:活動(dòng)性肺結(jié)核病人cx

4、cl12基因轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游-194bp位點(diǎn)甲基化率較正常人有顯著性下降，并且與患者外周血CXCL12蛋白表達(dá)水平呈明顯負(fù)相關(guān)。
　　綜上所述，肺結(jié)核病患者外周血中一組細(xì)胞因子的表達(dá)存在顯著性增加，其與潛伏感染者和正常人均存在顯著性差異。利用全基因組DNA甲基化芯片分析發(fā)現(xiàn)，宿主基因低甲基化狀態(tài)是結(jié)核病患者的顯著特征，其可能與患者異常的免疫反應(yīng)和細(xì)胞因子表達(dá)水平升高有關(guān)。本論文為深入了解結(jié)核病的免疫保護(hù)和免疫病理機(jī)制提供了新的理論數(shù)