核桃雜交群體花期物候變異與核桃總RNA提取方法研究.pdf

1、核桃屬于雌雄同株異花樹種,而且開花較早,并存在顯著的雌雄異熟性。北方地區(qū)核桃花期易受春季晚霜危害,致使核桃花期發(fā)生局部凍花,給生產(chǎn)上造成較大損失,因此,研究核桃開花期的物候特征對生產(chǎn)和育種上都具有有重要意義。為選育優(yōu)良早實核桃花期較晚品種及實現(xiàn)對早實核桃豐產(chǎn)的田間管理提供理論指導(dǎo),本研究通過對山東農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)實驗站核桃園121株綠園雜交一代實生群體連續(xù)三年花期物候調(diào)查,并進行了群體的花期物候變異研究；為進一步研究核桃的成花基因調(diào)控原理,

2、克隆早實核桃成花誘導(dǎo)途徑成花相關(guān)基因,誘導(dǎo)核桃早花,縮短核桃童期,本研究嘗試了不同方法提取核桃總RNA,最后改良CTAB法成功提取到質(zhì)量較好的總RNA,為成花相關(guān)基因的克隆體系的成功構(gòu)建,以及為成花相關(guān)基因的成功克隆奠定了基礎(chǔ),其主要結(jié)果如下： 1.通過對06～08連續(xù)三年的核桃成花各物候時期觀測統(tǒng)計分析,核桃開花不同物候時期的出現(xiàn)就群體而言差異不大,但對于整個群體集中出現(xiàn)某一開花物候現(xiàn)象在時間上有較大差異。核桃雌花始期一般出現(xiàn)

3、在4月上旬,單株不同年份間一般相差2～6天,但就整個群體而言,不同年份間群體雌花始期集中于4月中下旬；雌花盛期單株不同年份間一般相差1～5天,雌花集中開放時間為4月中下旬至5月初,比雌花始期晚3～7天,尤其是08年雌花除持續(xù)期外各時期都比較分散,估計受氣候因子影響所致：雌花末期一般集中在5月上中旬,不同年份間,核桃單株雌花末期一般相差2～8天,比雌花盛期晚7-10天；雌花持續(xù)期一般為10～20天,其中以15天為最多；通過對核桃雄花始期兩

4、年的物候調(diào)查發(fā)現(xiàn),雄花始期在群體中出現(xiàn)較集中,雄花物候期也較穩(wěn)定。 2.通過對06～08年的雌花始期、盛期、末期單株間和年份間進行方差分析可知：除雌花持續(xù)期單株間差異不顯著(P值>0.05)外,其他雌花各物候期單株間差異顯著(P值<0.01),因此對核桃雌花除持續(xù)期以外各物候期進行選擇是有效的。 雌花各物候時期表型方差較大,變幅在35.477～38.129之間,除雌花持續(xù)期外其他時期的表型變異系數(shù)差異較小,變幅為47.6

5、％～56.1％,說明在子代群體中選擇范圍較廣、潛力較大；雌花各物候期性狀的遺傳變異系數(shù)都較高,說明遺傳變異基礎(chǔ)豐富,選擇潛力較大；雌花各物候期的廣義遺傳力都較大,變幅為82.7％～99.4％,即花期性狀受遺傳影響較大,受環(huán)境影響小,這些性狀在早代進行選擇就可以得到固定,提高早代選擇效率和選擇準確性；對121株核桃雌花各物候期作了選擇率為5％相對遺傳進度測定,雌花始期、盛期、末期、持續(xù)期的的遺傳相對遺傳進度分別為：114.8％、96.7％

6、、97.5％、26.6％,因此,可在早代依雌花始期這一物候性狀進行嚴格選擇,能獲得較好的預(yù)期效果。 通過對核桃子代群體雌花始期的聚類分析及類中心的顯著性檢驗,將整個子代121株核桃劃分為20個類別,對子代121株核桃雌花始期進行直接選擇。選擇到雌花始期較晚的單株共8株。 3.本研究證明改良CTAB法是適合核桃總RNA提取的快速、簡便、經(jīng)濟的方法。此方法提取的核桃嫩葉總RNA的電泳結(jié)果可見清晰完整的條帶,證明改良CTAB法