靶向磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3預(yù)定位法檢測(cè)肝細(xì)胞癌的MRI研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2012級(jí)碩士學(xué)位論文靶向磷脂酰肌醇蛋白聚糖一3預(yù)定位法檢測(cè)肝細(xì)胞癌的MRI研究MRMolecularImagingStudiesofGlypican3targetingPretargetingTechnologyforHepatocellularCarcinoma課題來源：學(xué)導(dǎo)專培培所廣東省自然科學(xué)基金位申請(qǐng)人師姓名業(yè)名稱養(yǎng)類型養(yǎng)層次在學(xué)院答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)委員李維粵吳元魁副教授影像醫(yī)學(xué)與核醫(yī)學(xué)專業(yè)型碩士研究生第一臨

2、床醫(yī)學(xué)院李勇教授馮衍秋教授郭燕教授鄭可國教授黃穗喬教授2015年5月9日廣州摘要L5多肽具有相同的靶向性能但其分子量小、價(jià)格低廉且無免疫源性。在成像方式方面，為了提高對(duì)比增強(qiáng)作用，引入生物素親和素系統(tǒng)(biotinavidinsystem，BAS)。此系統(tǒng)具有高親和性及高特異性，并易于結(jié)合多種標(biāo)記物而不影響其功能。對(duì)比起直接靶向法，BAS能明顯地提高靶向組織的對(duì)比劑攝取量。因此，本文應(yīng)用L5多肽作為靶向GPC3蛋白的配體，將與聚乙二醇(

3、polyethyleneglycol，PEG)結(jié)合的超小超順磁性氧化鐵(ultrasmallsuperparamagneticironoxide，USPIO)作為對(duì)比劑，并應(yīng)用生物素親和素預(yù)定位系統(tǒng)，進(jìn)行HCC磁共振分子成像。研究?jī)?nèi)容及方法：1采用直接免疫熒光檢測(cè)L5多肽與肝癌細(xì)胞的結(jié)合情況：通過收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期HepG2肝癌細(xì)胞和人正常肝細(xì)胞HL7702并計(jì)數(shù)，以每孔5x10s分別接種在六孔板，各設(shè)3個(gè)復(fù)孑L，37℃培養(yǎng)過夜；用無血清培

4、養(yǎng)基配制01mg／mlL5FAM溶液，然后去除六孔板內(nèi)培養(yǎng)液，PBS液洗滌，加入2mlL5FAM溶液至每個(gè)孔中，37℃恒溫培養(yǎng)箱避光孵育2h；用PBS液洗滌，去除未結(jié)合熒光多肽，加入4％多聚甲醛室溫固定細(xì)胞，用PBS洗滌，然后滴加熒光抗淬滅劑，然后置于倒置熒光顯微鏡觀察，并用FAM溶液作對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。2L5多肽與肝細(xì)胞癌的結(jié)合抑制實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)合的特異性：選擇HepG2作為研究對(duì)象，先將濃度為lmg／ml的未標(biāo)記FAM的L5多肽加入培養(yǎng)板六