CPG寡核苷酸對(duì)卵清蛋白致敏幼鼠血清中Th1-Th2細(xì)胞因子及肥大細(xì)胞趨化蛋白1的影響.pdf

1、研究目的：利用卵清蛋白（OVA）能否對(duì)2~3周齡BALB/C幼鼠致敏建立食物過敏動(dòng)物模型，探討不同劑量致敏液對(duì)模型制備的影響，同時(shí)觀察非甲基化胞嘧啶鳥嘌呤寡核苷酸（CPG oligodeoxynu-cleotide,CPG-ODN）對(duì)OVA致敏幼鼠血清中OVA-IgE水平及Th1/Th2相關(guān)細(xì)胞因子、肥大細(xì)胞趨化蛋白1（mMCP-1）的影響，探討mMCP-1在食物過敏中的作用。
　　對(duì)象及方法：
　　研究對(duì)象：40只BALB

2、/C雌性幼鼠(2～3周)。
　　方法：將40只BALB/C雌性幼鼠(2～3周)分為對(duì)照組、不同劑量OVA致敏組（20μg、50μg和100μg組）及CPG-ODN干預(yù)組（50μgOVA+CPG-ODN），每組8只。于實(shí)驗(yàn)第0及第14天予OVA致敏液腹腔注射行基礎(chǔ)致敏，激發(fā)致敏則采取相同劑量經(jīng)口灌服方式從致敏第17天始每隔2日灌胃直至實(shí)驗(yàn)第29天結(jié)束，在激發(fā)致敏階段干預(yù)組給予CPG-ODN干預(yù)，觀察小鼠致敏前后的癥狀表現(xiàn)，并及時(shí)記錄

3、。所有組小鼠在最后一次激發(fā)結(jié)束3小時(shí)后摘眼球取血離心，收集血清，并于脫臼處死前取空腸0.5cm做常規(guī)HE染色。用ELISA法檢測所有組小鼠血清中OVA-IgE含量及CBA法檢測Th1、Th2相關(guān)細(xì)胞因子及肥大細(xì)胞趨化蛋白1的水平。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　1.小鼠食物過敏動(dòng)物模型制備成功，①據(jù)癥狀評(píng)分系統(tǒng)：對(duì)照組小鼠未見明顯癥狀；實(shí)驗(yàn)組評(píng)分（平均分），20μg組小鼠22（2.75）；50μg組小鼠31（3.88）；100μg組1

4、9（2.38）分；②血清中卵清蛋白IgE水平，3個(gè)致敏組的OVA-IgE含量明顯高于對(duì)照組，且每個(gè)致敏組含量均大于對(duì)照組均數(shù)+3S，（P=0.001<0.01）；③食物過敏組小鼠小腸粘膜病理改變與對(duì)照組比較，粘膜固有層大量淋巴細(xì)胞浸潤及少量嗜酸性粒細(xì)胞侵襲，明顯血管擴(kuò)張，3個(gè)不同劑量組間炎性細(xì)胞浸潤及血管擴(kuò)張程度不同，以50μg組最顯著，CPG-ODN干預(yù)組較過敏組程度輕。
　　2.致敏后幼鼠血清中Th1/Th2及mMCP-1含量

5、：①血清中IFN-γ水平變化：20μg組、50μg組水平明顯低于對(duì)照組（P<0.05）；100μg組與對(duì)照組間無明顯差異(P>0.05）；20μg組血清IFN-γ水平與50μg組、100μg組比較（P>0.05），均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，50μg組與100μg組比較明顯降低（P<0.05）,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　②血清中IL-4水平變化：IL-4水平20μg、50μg、100μg組明顯高于對(duì)照組（P<0.01）；20μg組、100μg

6、組血清IL-4水平均低于50μg組（P<0.05），20μg組水平較100μg組升高（P<0.05），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　?、坌∈笾旅艉笱逯蟹蚀蠹?xì)胞趨化蛋白1（mMCP-1）變化：mMCP-1水平20μg、50μg、100μg組明顯高于對(duì)照組（P<0.05）；20μg組、100μg組血清mMCP-1水平均低于50μg組（P<0.05）,均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，20μg組與100μg組間無差異（P>0.05）。
　　3.腹腔注射

7、CPG-ODN后小鼠血清中OVA-IgE及Th1/Th2、mMCP-1變化：CPG-ODN組與50μg組比較，血清OVA-IgE、IL-4及mMCP-1水平均降低（P<0.05）；而IFN-γ則相應(yīng)性升高（P<0.05），均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)論：
　　1.卵清蛋白可以建立2-3周齡BALB/C幼鼠食物過敏動(dòng)物模型。
　　2.在致敏的3個(gè)劑量組中以50μg組致敏效果最好，20μg組次之，100μg組最差。并且存在在一