Shh信號傳導(dǎo)途徑在原代培養(yǎng)皮層星形膠質(zhì)細胞氧化應(yīng)激中的保護作用.pdf

1、目的：探討Shh信號傳導(dǎo)途徑在原代培養(yǎng)皮層星形膠質(zhì)細胞氧化應(yīng)激中的保護作用。
　　 方法：本實驗在華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院中心實驗室及神經(jīng)內(nèi)科實驗室完成。1.取出生后1-3天SD新生鼠皮層膠質(zhì)細胞進行培養(yǎng)，并給予過氧化氫模擬氧化應(yīng)激，用Real-time PCR以及Western-blot檢測內(nèi)源性Shh、Patched、Gli-1的表達；2.原代培養(yǎng)的皮層星形膠質(zhì)細胞氧化應(yīng)激中給予外源性Shh，及Shh信號傳導(dǎo)通路阻

2、滯劑Cyclopamine或5E1處理，用MTT方法觀察細胞的活力；用流式細胞儀檢測細胞凋亡狀況；3.用RT-PCR和Western-blot觀察藥物處理后細胞中Bcl-2和Bax的表達變化。
　　 結(jié)果：1.皮層星形膠質(zhì)細胞氧化應(yīng)激時內(nèi)源性Shh、Patched、Gli-1的表達上調(diào)；2.給予外源性Shh可明顯增加皮層星形膠質(zhì)細胞氧化應(yīng)激時細胞的存活力，減少細胞的凋亡，Cyclopamine或5E1可部分抑制該作用；3.外源性