犬超數(shù)排卵及手術(shù)法取卵的研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)的主要內(nèi)容分為犬的超數(shù)排卵技術(shù)、通過外科手術(shù)法獲得成熟卵母細(xì)胞以及實(shí)驗(yàn)室鏡檢排卵情況三部分。
　　犬的超數(shù)排卵技術(shù)是在外源性激素PMSG與hCG的聯(lián)合應(yīng)用下進(jìn)行的，選用5只健康未發(fā)情母犬，體重約為5kg，實(shí)驗(yàn)第1天即給母犬注射PMSG，1-8天連續(xù)每天肌肉注射200 IU PMSG,隔3天即第11天肌肉注射2000 IU hCG,隔10天即在第21天通過手術(shù)法進(jìn)行取卵。
　　手術(shù)法取卵是以經(jīng)超數(shù)排卵后的母犬為基礎(chǔ)，采用

2、舒泰50進(jìn)行麻醉，于臍后沿腹正中線做切口，切開皮膚和皮下組織，暴露腹腔，找到子宮、卵巢以及輸卵管一并摘除，摘除后一并放入保溫瓶中帶回實(shí)驗(yàn)室。
　　實(shí)驗(yàn)室鏡檢排卵情況是先以生理鹽水清洗子宮、卵巢以及輸卵管，剪掉多余組織，從宮管結(jié)合部用1mL的針頭注入沖卵液（10mL沖卵液反復(fù)沖洗），另一端用平皿接收流出的液體，完成卵母細(xì)胞的收集。使用透明質(zhì)酸酶機(jī)械地剝離卵丘細(xì)胞從而獲得裸卵，排出第一級體的細(xì)胞即為成熟卵母細(xì)胞。染色后可以更直觀清晰的