骨形態(tài)發(fā)生蛋白及骨轉(zhuǎn)化生長因子在同種異體骨段移植愈合中的表達(dá).pdf

1、目的觀察骨形態(tài)發(fā)生蛋白及骨轉(zhuǎn)化生長因子在同種異體骨段移植愈合過程不同時相的表達(dá)及組織分布情況，分析其作用機(jī)制，進(jìn)而探討研究同種異體骨段移植愈合的過程和特點(diǎn)。 方法新西蘭大白兔60只，12只制備移植用深低溫冷凍同種異體骨段。48只于橈骨中段手術(shù)截除1.5cm長骨干和骨膜，植入深低溫保存的同種異體皮質(zhì)骨段，建立動物模型。于術(shù)后2、4、6、8、12周行X光拍片；術(shù)后1、2、4、6、8、12周取材，行大體標(biāo)本、HE組織學(xué)觀察，以及Bmp

2、-2及Tgf-β1免疫組織化學(xué)染色觀察。 結(jié)果(1)X線骨端愈合率：移植后2周，宿主骨—異體骨接合部骨折線清晰，未見骨痂影像。移植后4周，宿主骨—異體骨接合部出現(xiàn)外骨痂，包括連續(xù)性骨痂和不連續(xù)性骨痂，近端達(dá)100％，遠(yuǎn)端81.4％；接合部骨折線已模糊或完全消失者，近端達(dá)45.5％，遠(yuǎn)端23.5％；移植后6周，宿主骨—異體骨接合部骨折線消失者，近端達(dá)83.5％，遠(yuǎn)端65.7％；移植后8周，骨端愈合率以骨接合端出現(xiàn)三面橋梁骨痂或骨折

3、線模糊為準(zhǔn)，近端達(dá)100％，遠(yuǎn)端74.5％。移植后12周，近端、遠(yuǎn)端接合部全部愈合，骨痂縮小，并可見髓腔改建。 (2)大體標(biāo)本觀察：4周內(nèi)，異體骨段周圍有中等量骨痂生長，以內(nèi)側(cè)明顯，但無有效連接。術(shù)后4-6周，異體段周圍有大量骨痂，兩接合處較緊密連接。術(shù)后8-12周，移植骨段的遠(yuǎn)近端均與宿主骨完全連成一體，外骨痂塑形，小而致密，并可見髓腔改建。 (3)組織學(xué)觀察：移植后4周，骨接合端的骨痂向異體骨生長，骨皮質(zhì)表面形成骨吸

4、收陷窩，異體骨段內(nèi)哈佛氏管擴(kuò)大，有少量新骨形成；移植后6-8周，兩接合端已有骨小梁連接，異體骨皮質(zhì)周圍骨原細(xì)胞和成骨細(xì)胞生長活躍；有較多擴(kuò)大的哈佛氏管，新的管狀結(jié)構(gòu)形成，異體骨被部分吸收替代；8-12周，異體骨段外側(cè)新的骨單位發(fā)育成熟，已形成新的皮質(zhì)結(jié)構(gòu)，其內(nèi)部原有結(jié)構(gòu)與擴(kuò)大的哈佛氏管及骨吸收陷窩摻雜。哈佛氏管內(nèi)及髓腔邊緣新生成骨細(xì)胞呈“鑲邊”樣排列。 (4)免疫組織化學(xué)染色：BMP-2在移植后4周，骨吸收陷窩及異體骨內(nèi)擴(kuò)大的哈

5、佛氏管強(qiáng)陽性表達(dá)；6-8周，擴(kuò)大的哈佛氏管內(nèi)生長活躍的破骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞、骨細(xì)胞和新的管狀結(jié)構(gòu)等強(qiáng)陽性表達(dá)；8-12周，吸收骨陷窩內(nèi)生長活躍的骨細(xì)胞及其周圍的類骨質(zhì)強(qiáng)陽性表達(dá)。異體骨自身、成熟軟骨細(xì)胞、成熟骨小梁基質(zhì)中未見BMP-2表達(dá)。TGF-β1在移植術(shù)后1周，原始骨痂成骨細(xì)胞呈陽性著色，肉芽組織中單核巨噬細(xì)胞以及間質(zhì)細(xì)胞呈陽性染色；術(shù)后2周，新形成的軟骨細(xì)胞及軟骨基質(zhì)成陽性染色，成熟軟骨有較強(qiáng)表達(dá)，肥大的軟骨細(xì)胞則無陽性染色；2周

6、后，幼稚軟骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞及骨基質(zhì)均呈現(xiàn)陽性染色；異體骨始終無限性染色。 結(jié)論(1)BMP-2主要來源于新生骨的成骨細(xì)胞和類骨質(zhì)中。TGF-β1主要分布在間質(zhì)細(xì)胞、幼稚及成熟的軟骨細(xì)胞中。異體骨本身BMP-2及TGF-β1無陽性表達(dá)，但在異體骨移植愈合中骨誘導(dǎo)發(fā)揮了作用。(2)異體骨段與宿主骨的愈合過程中，新生骨通過異體骨皮質(zhì)的表面、骨陷窩、哈佛氏管、髓腔表面及骨接合端向異體骨侵襲，“爬行替代”是立體的，主要靠骨傳導(dǎo)實(shí)現(xiàn)。臨床上