ERCC1基因在食管鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及和Survivin、KI-68表達(dá)的相關(guān)性研究.pdf

1、第一部分:ERCC1蛋白質(zhì)在食管鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及和Survivin、Ki-67表達(dá)的相關(guān)性研究
　　目的:腫瘤的發(fā)生、發(fā)展是細(xì)胞中多種基因表達(dá)改變累積、互相作用復(fù)雜的病理過(guò)程，DNA修復(fù)基因的改變也是其中重要的一個(gè)環(huán)節(jié)。切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1（ERCC1基因）編碼一種單鏈DNA核酸內(nèi)切酶，該酶是核苷酸切除修復(fù)(NER)途徑的關(guān)鍵酶。ERCC1基因mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)水平可以反映NER途徑中DNA的修復(fù)活性，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、

2、放化療效果和預(yù)后的關(guān)系密切。本課題的目的是研究食管鱗狀細(xì)胞癌中ERCC1蛋白質(zhì)表達(dá)與癌旁正常食管粘膜表達(dá)的差異及與臨床病理特征的關(guān)系，ERCC1和Survivin、Ki-67蛋白質(zhì)表達(dá)的相關(guān)性以進(jìn)一步探討其作用機(jī)制，ERCC1蛋白質(zhì)表達(dá)是否為手術(shù)切除食管鱗狀細(xì)胞癌獨(dú)立的預(yù)后因素。
　　方法:70例食管鱗狀細(xì)胞癌患者術(shù)后腫瘤組織蠟塊，取癌旁＞5cm正常食管粘膜組織蠟塊41例作為對(duì)照。所有患者術(shù)前未行放、化療，排除雙原發(fā)癌及出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)

3、移者，用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)ERCC1、Survivin、Ki-67蛋白質(zhì)表達(dá)情況，用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析ERCC1蛋白質(zhì)表達(dá)與正常食管粘膜表達(dá)的差異及與食管鱗狀細(xì)胞癌組織的分化程度、浸潤(rùn)深度、腫瘤長(zhǎng)度、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系。用Spearman等級(jí)相關(guān)分析ERCC1與Survivin蛋白質(zhì)表達(dá)的相關(guān)性，ERCC1與Ki-67表達(dá)的相關(guān)性。用Cox回歸模型分析ERCC1、Survivin、Ki-67標(biāo)記指數(shù)、腫瘤浸潤(rùn)深

4、度、腫瘤細(xì)胞分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)、臨床分期、術(shù)后放化療這些因素中影響預(yù)后的獨(dú)立因素。
　　結(jié)果:
　　1、70例食管鱗狀細(xì)胞癌組織中46例ERCC1陽(yáng)性表達(dá)，陽(yáng)性表達(dá)率65.7％(46/70)，顯著高于癌旁正常食管粘膜組織9.8％(4/41)(P＜0.01)。70例食管鱗狀細(xì)胞癌組織中42例Survivin陽(yáng)性表達(dá)，陽(yáng)性表達(dá)率60.0％(42/70)，顯著高于癌旁正常食管粘膜組織19.5％(8/41)(P＜0.01)。<

5、br>　　2、食管鱗狀細(xì)胞癌組織的不同分化程度（x2=1.061，P＞0.05）、浸潤(rùn)深度(x2=0.531，P＞0.05)、腫瘤長(zhǎng)度(x2=0.206，P＞0.05)、臨床分期(x2=0.225，P＞0.05)、及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)(x2=0.078，P＞0.05)之間ERCC1蛋白質(zhì)表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3、食管鱗狀細(xì)胞癌中ERCC1和Survivin蛋白質(zhì)表達(dá)有明顯相關(guān)性(r=0.40，P＜0.01)，ERCC1和Ki-6

6、7表達(dá)無(wú)明顯相關(guān)性(r=0.062，P＞0.05)。
　　4、Cox回歸模型多因素分析結(jié)果顯示放化療是影響手術(shù)切除的食管鱗狀細(xì)胞癌預(yù)后的獨(dú)立因素?；颊呓Y(jié)受放化療的相對(duì)危險(xiǎn)度是0.379，95％可信區(qū)間:0.15-0.955，P＜0.05。ERCC1陰性表達(dá)患者平均生存期31個(gè)月，陽(yáng)性表達(dá)患者平均生存期25個(gè)月，ERCC1并非獨(dú)立的預(yù)后因素（P＞0.05）。
　　結(jié)論:ERCC1、Survivin蛋白質(zhì)表達(dá)在食管鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生

7、、發(fā)展過(guò)程中起重要作用。食管鱗癌組織的不同的分化程度、浸潤(rùn)深度、腫瘤長(zhǎng)度、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)之間ERCC1蛋白質(zhì)表達(dá)無(wú)明顯差異。ERCC1與Survivin在食管鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中可能存在協(xié)同作用。食管鱗狀細(xì)胞癌ERCC1蛋白質(zhì)表達(dá)與細(xì)胞增殖無(wú)明顯相關(guān)性。ERCC1并非手術(shù)切除的食管鱗狀細(xì)胞癌獨(dú)立的預(yù)后因素。
　　第二部分:ERCC1mRNA在食管鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及和Survivin、Ki-67表達(dá)的相關(guān)性研究

8、>　　目的:檢測(cè)食管鱗狀細(xì)胞癌組織中ERCC1、SurvivinmRNA表達(dá)，研究食管鱗狀細(xì)胞癌組織和癌旁正常食管粘膜ERCC1、SurvivinmRNA表達(dá)的差異，ERCC1mRNA表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系，ERCC1、SurvivinmRNA表達(dá)的相關(guān)性。
　　方法:收集72例食管鱗狀細(xì)胞癌患者術(shù)后腫瘤組織，取癌旁＞5cm正常食管粘膜組織72例作為對(duì)照，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組為配對(duì)樣本。所有患者術(shù)前未行放、化療，排除雙原發(fā)癌及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移

9、者，用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR方法檢測(cè)ERCC1、SurvivinmRNA表達(dá)情況，分析食管鱗狀細(xì)胞癌和癌旁正常食管粘膜ERCC1mRNA表達(dá)的差異，食管鱗狀細(xì)胞癌和癌旁正常食管粘膜SurvivinmRNA表達(dá)的差異，ERCC1mRNA表達(dá)與食管鱗狀細(xì)胞癌組織的腫瘤細(xì)胞分化程度、腫瘤浸潤(rùn)深度、腫瘤長(zhǎng)度、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)之間的關(guān)系，ERCC1與SurvivinmRNA表達(dá)的相關(guān)性。
　　結(jié)果:
　　1、食管鱗狀細(xì)胞癌組

10、織中ERCC1mRNA表達(dá)高于癌旁正常食管粘膜組織，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。SurvivinmRNA表達(dá)高于癌旁正常食管粘膜組織，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　2、食管鱗狀細(xì)胞癌組織的不同腫瘤細(xì)胞分化程度、腫瘤浸潤(rùn)深度、腫瘤長(zhǎng)度、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)之間ERCC1mRNA表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　3、食管鱗狀細(xì)胞癌中ERCC1和SurvivinmRNA表達(dá)有明顯相關(guān)性(r=0