春劍花梗離體培養(yǎng)中褐化的研究.pdf

1、研究春劍(Cymbidum.longibracteatum)花梗組培褐化的影響兇素及控制方法，盡量延長花梗在培養(yǎng)基中的成活時(shí)間，是成功建立春劍花?？旆斌w系的關(guān)鍵一步。 外植體褐化除了受內(nèi)因--外植體的節(jié)位、節(jié)數(shù)、花梗成熟度的影響外，還受外因--母株的生長環(huán)境、取材月份、外植體的接種方式、抗氧化劑、吸附劑、切口封閉、暗培養(yǎng)、熱激、Fe鹽等多種因素的影響。本研究對(duì)影響春劍花梗褐化的多種內(nèi)、外因素進(jìn)行了較系統(tǒng)的研究，結(jié)果表明：

2、 1.在外植體大小、擺放方式對(duì)褐化影響方面：中節(jié)、頂節(jié)的單節(jié)外植體，帶苞葉、半嵌入培養(yǎng)基放置或者不帶苞葉、平放于平面培養(yǎng)基以及多節(jié)花梗、帶苞葉，極性放置、半嵌入斜面培養(yǎng)基這三種組合方式都可以有效減輕褐變，保持外植體鮮活。帶苞葉的外植體接種后15～20d去除苞葉，外植體鮮活度高。 2.在取材月份與外植體生長環(huán)境方面：2月份取花梗未全部伸長，節(jié)間緊縮，花梗苞葉包裹，花萼末展開的帶菌少的健康無病蟲害花梗為外植體，可以有效減輕褐化。

3、 3.在吸附劑處理的防褐方面：花梗的褐化率隨著活性炭、PVP濃度的增加而增加。防褐效果不理想，甚至加劇外植體褐變。 4.在抗氧化劑處理防褐方面：抗壞血酸和檸檬酸防褐效果好，它們抗褐化的最佳濃度分別為2g/L，5g/L。硫代硫酸鈉防褐效果不理想。 5.切口封閉處理為本次試驗(yàn)中防褐最佳的處理，切口封閉處理延長了外植體完全褐化的時(shí)間，其中醫(yī)用兒士林封閉效果優(yōu)于石蠟封閉。 6.就低氨態(tài)氮的改良1/2MS培養(yǎng)基的效果最